产品内容
产品说明
Visclone Universal One Step Cloning Kit 是基于同源重组原理开发的一款简单、快速、高效的无缝克隆试剂 盒,可快速将含有载体末端重叠区域的插入片段定向克隆至线性化载体。将载体通过酶切进行线性化处理, 在插入片段正/反向PCR扩增引物的5’端引入线性化载体上的15~25nt末端序列,通过重组酶的作用使得 具有重叠区域的片段和载体最快在50℃,5min内重组,完成定向无缝克隆。 本产品为通用型Mix,可以兼容1~5个DNA片段的重组反应,2×ViscloneUniversalCloningmix中添加的 辅助因子和优化的反应体系使产品具有更高的阳性率和兼容性。试剂盒提供的pUC19ControlPlasmid和 Control Fragment 可以作为阳性对照用于排除实验其它操作因素的影响。
产品特点
1. 快速:单片段重组最低只需5min,多片段重组最低只需15min。
2. 兼容性强:适用于1-5个片段的快速无缝克隆、定点突变和高通量克隆等实验。
3. 无缝:插入位点无需引入不需要的碱基序列,真正实现无缝克隆。
运输及储存条件
蓝冰运输;-20℃保存12个月,避免反复冻融。
注意事项
1. 重组产物冰上冷却后,可直接转化化学感受态细胞,推荐使用商业化感受态进行转化,重组产物转化体 积最多不应超过所用感受态细胞体积的1/10。
2. 自备材料:片段扩增所需模板、引物;线性化载体;高保真聚合酶;感受态细胞等。
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