酵母蛋白提取试剂盒(变性)

货号:SK2440
品牌:Coolaber
存储条件:RT
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SK2440-50T 50 T ¥398.00 请登录 请登录

产品介绍

本产品通过使用玻璃珠震荡法,结合化学裂解法破碎酵母细胞壁,适用于多种酵母菌的培养物(包括菌液或平板菌落)。提取的酵母总蛋白可用于SDS-PAGE凝胶电泳及免疫印迹(Western Blot)实验。本产品提取蛋白为变性蛋白,不能用于蛋白活性检测等相关实验。

 

产品内容

 

储存条件

RT,未开封有效期24个月。

 

准备步骤

将提取液成分II全部加到提取液成分I中,充分混匀作为提取液备用,未用部分-20 ℃冻存。

 

操作步骤

1.5,000 rmp,4 ℃离心5 min收集酵母菌液细胞沉淀(酵母菌液OD值0.5-2.0)。

2.加入1 mL洗涤液震荡混匀,5,000 rmp,4 ℃离心5 min沉淀酵母细胞,弃上清。

3.用100 μL提取液悬浮酵母细胞,并快速转移到1.5 mL离心管中,95-100 ℃金属浴或水浴3 min。

4.加入0.2 g玻璃珠,旋涡震荡器上剧烈震荡5-10 min。

5.用移液器或者巴斯德吸管回收提取液。

6. 剩余玻璃珠的离心管中再次加入100 μL提取液,稍加震荡,再次回收提取液。

7. 合并两次提取液即为酵母总蛋白样品。

8. (可选步骤)12,000 rmp,4 ℃离心15 min,上清含可溶性蛋白质,沉淀含不溶性蛋白质。

9. 总蛋白样品于95-100 ℃金属浴或水浴1 min,可直接用于SDS-PAGE电泳(无需添加Loading buffer)。

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