QIAGEN Multiplex PCR Plus Kit基于QIAGEN专有的多重PCR技术，含有即用型混合液。该试剂盒所有的成分专为提供最易操作和最大速度研发，提供一致可靠的结果（参见下表）。Multiplex PCR Master Mix包含优化的HotStarTaq Plus DNA Polymerase和MgCl₂浓度，以及dNTP和新型的PCR缓冲液。

多重PCR成功的关键因素，用于各种应用的一致可靠的结果

Multiplex PCR为研究者节省时间和成本用于进行大量的PCR反应，广泛应用于基因分型以及在研究、法医和分子检测实验室的DNA或cDNA检测应用。应用范围包括分型和转基因生物和病原体的分析、微卫星的扩增分析、检测SNP突变区域，以及宏基因组学研究。然而，多重PCR技术要求严格。PCR优化是多重PCR成功与否的关键因素。多重PCR中不同引物对不同杂交动力学可能导致如下问题，如扩增偏向性。能高效率结合的引物，更多地利用扩增反应元件，从而降低了其他PCR产物的产量。由于更大的引物量，因此存在更大的形成引物二聚体和非特异性启动的风险。不解决这些风险导致低灵敏度、非特异性扩增和选择靶位的偏向性扩增，因此得到不一致的不令人满意的结果。共格这些瓶颈需要繁琐耗时的优化步骤，导致成本的增加。QIAGEN Multiplex PCR Plus Kit消除了这些风险，在首次尝试时就运行顺利。Multiplex PCR Master Mix独特的组成确保了高特异性和灵敏度的扩增反应，甚至是难扩增的靶位。该试剂盒能快速成功地建立所有多重PCR检测，有效的节省时间和成本。

HotStarTaq Plus DNA Polymerase

HotStarTaq Plus DNA Polymerase是Taq DNA聚合酶的优化形式，在室温下无聚合酶活性。这能防止在PCR设置和PCR初始循环过程中，低温下非特异性退货引物的延伸和引物二聚体的形成。无需优化反应条件。在室温下可方便设置多重检测。HotStarTaq DNA Polymerase在95°C下孵育5分钟激活，可整合入现有的各种热循环程序中。

多重PCR缓冲液

这特殊的缓冲液包含优化的混合物由K⁺和NH^₄+以及独特的PCR辅助剂、MP因子组成可增加模板引物的局部浓度。将非特异性退火最小化并成功地平行扩增所有靶位，甚至只有非常少量的模板。配合K⁺和其他阳离子、MP因子稳定特异性结合的引物，并能够用HotStarTaq Plus DNA Polymerase进行高效的引物延伸。通过在每个PCR循环中高比率的特异性-非特异性引物结合，该新型的缓冲液维持每个PCR循环的特异性扩增。由于KCl和(NH₄)₂SO₄独特的平衡结合，相比传统的PCR缓冲液，该缓冲液能在更广泛的退火温度和Mg²⁺浓度下，提供严格的引物退火条件。通过改变退火温度或Mg²⁺浓度可优化PCR，因此通常将优化过程最小化或无需要优化。

该试剂盒包含独特的辅助剂Q-Solution，促进难扩增的靶位扩增如富含GC的区域或具有复杂二级结构的模板。该试剂盒还含有高度灵活的CoralLoad Dye，通过提高移液器的可视性和后续的凝胶上样以及DNA迁移的可视性，来进一步提高操作的方便性。

操作流程

应用