产品简介

YEP培养基（Yeast Extract Peptone Broth Medium）常用于农杆菌的增菌培养。酵母浸粉和蛋白胨提供碳氮源、维生素和生长因子；氯化钠可维持均衡的渗透压。

成分组成：(g/L)

配制方法(仅供参考)

1. 称取适量培养基，加蒸馏水至1 L，搅拌均匀，调pH值至7.0±0.2。

2. 121 ℃高温灭菌15 min或115 ℃高温灭菌20 min。

3. 固体培养基冷却到50-60 ℃，加入抗生素，倾倒平皿，4 ℃避光保存备用。

农杆菌感受态制备(仅供参考)

1. 活化：将农杆菌菌种（-80 ℃）室温解冻，划线至YEP平板上（50 mg/L Rif）28 ℃过夜活化。

2. 小摇：挑取单克隆接种于5 mL液体YEP培养基，28 ℃，200 rpm培养过夜。

3. 大摇：取2 mL过夜菌液接种于50 mL液体YEP培养基中，28 ℃生长至OD600约等于0.5左右。

4. 离心：采用1.5 mL离心管，4 ℃，4500 rpm离心10 min，弃上清，收集菌体。

5. 取现配的0.1 mol/L的CaCl2溶液400 μL溶解上述菌块，冰上静置30 min；

6. 再次离心，用100 μL的CaCl2溶液溶解上述菌块，即为农杆菌感受态。

注意事项

1. 注意无菌操作，避免微生物污染。

2. 根据菌株生长特性，可适当调整pH值。

3. 该培养基仅用于科研领域，不宜用于临床诊断或其它用途。

4. 称量时注意粉尘，佩戴口罩操作以避免引起呼吸道系统不适。

5. 干粉培养基使用后立即旋紧瓶盖，避免吸潮结块。未开封产品保质期三年，开封后根据存放条件的不同保质时间存在一定的差异。