丙氨酸氨基转移酶 (谷丙转氨酶/ALT/GPT) 测试盒 (赖氏法) 微板法

货号:C009-2-1
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产品简介

ALT为一种参与人体蛋白质新陈代谢的酶(相当于工业生产中的催化剂),起加快体内蛋白质氨基酸在体内转化的作用,它广泛存在于人体各种组织.器官.肌肉.骨骼中,以肝脏细胞的细胞浆中最多。当人体内各组织器官活动或病变时,就会把其中的ALT释放到血液中,使血清ALT含量增加。例如,肝脏发炎时,转氨酶就会从肝细胞释放到血液中,肝脏有病,血清转氨酶一定增高,当肝细胞千分之一有炎症时,血清转氨酶含量就会增高一倍以上,因此,血清转氨酶数量是肝脏病变程度的重要指标。

谷丙转氨酶(ALT)在 37℃及 PH7.4 条件下,作用于丙 氨酸及α-酮戊二酸组成的底物,生成丙酮酸及谷氨酸。反应 30min 后(固定时间)加入 2,4-二硝基苯肼(DNPH)盐酸溶液,既中止反应,同时 DNPH 与酮酸中羰基加成,生成丙酮酸苯腙。苯腙在碱性条件下呈红棕色,于 505nm 比读吸光度并计算酶活力。

 

试剂的组成与配制

试剂一:谷丙转氨酶基质液,5mL×1 瓶,4℃冰箱保存 6 个月;

试剂二:2,4—二硝基苯肼液,5mL×1 瓶,4℃冰箱保存 6 个月;

试剂三:4mol/L 氢氧化钠液,5mL×1 瓶,室温密封保存 6 个月;

0.4mol/L 氢氧化钠液的配制,临用时按 4mol/L 氢氧化钠液∶双蒸水=1∶9 的比例稀释,需多少配多少,室温密封保存。

试剂四:2μmol/mL 丙酮酸钠标准液×1 支,4℃冰箱保存 6 个月;

试剂五:0.1mol/L 磷酸盐缓冲液×1 支,4℃冰箱保存 6 个月。

 

注意事项

1、比色法中常用的有赖氏(Reitman-Frankel)法及金氏(King)法。赖氏法标准曲线所定单位数,是用实验方法和卡门氏分光光度法(速率法)作对比测定求得的。以卡门氏单位报告结果,比较准确。 

2、一般血清标本内源性酮酸很少,血清对照孔吸光度值接近试剂空白孔(以双蒸水代替血清,其他和对照孔同样操作)。所以,成批标本测定时,一般不需要每一标本都作本身血清对照孔,以试剂空白孔代替即可,但对脂血、黄疸或溶血血清,每份标本应作对照孔。

3、酶活力超过 150 卡门氏单位时,用生理盐水稀释血清后重测。

4、应将一般血清的对照孔(或称标本空白孔)的吸光度作为日常质控的指标之一;如相差大,可考虑α-酮戊二酸浓度、DNPH 浓度及仪器等原因引起。

5、血清中 ALT 在室温(25℃)可保存 2 天,在 0~4℃可保存一周,在-25℃可保存 1 个月。

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