产品简介

IPTG 为安慰性诱导物，X-gal 为生色底物，二者共同用于蓝白斑筛选。IPTG 可诱导载体 Lac 操纵子 DNA 区段合成β-半乳糖苷酶氨基端片段，该片段可与宿主细胞编码的缺陷型β-半乳糖苷酶实现基因内互补(α互补)。实现α互补的细菌铺在含有 X-gal 生色底物的培养基上，可形成蓝色菌落。外源DNA 插入质粒的多克隆位点后可破坏α互补作用，将产生白色菌落。

使用方法

 蓝白色筛选： 

（1）在 100mL 的琼脂培养基中，加入 500μL 的 X-gal 溶液（20mg/mL）、250μL 的 IPTG 溶液 （50mg/mL）和 100μL 的 Amp 溶液（氨苄青霉素 100 mg/mL），制作成含 X-Gal、IPTG 和 Amp 的平 板培养基。高压灭菌后的培养基需冷却至 55℃以下时加入 X-gal、IPTG 和 Amp，以防失活。 

（2）实际上 X-gal 和 IPTG 可以直接涂抹在平板培养基表面， 90mM 的平板，X-gal（20mg/mL） 涂 40μL，IPTG（50mg/mL）涂 16μL。150mm 的平板加倍，待涂布的液体干后即可使用。细菌铺板 后，37℃培养过夜，可根据长出菌落的蓝白色，而方便地挑选出基因重组体（白色菌落为具有 DNA 插入片段的基因重组体）。

备注：

X-Gal也可以用于酵母菌LacZ基因表达检测。参照说明书YK3020 β-半乳糖苷酶显示试剂盒。