16S (V3-V4) Metagenomic Library Construction Kit for NGS

货号:R161
品牌:TaKaRa
存储条件:-20ºC
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R161A 50 Tests EA ¥6703.00 请登录 请登录
R161B (A × 2) 50 Rxns × 2 EA ¥12893.00 请登录 请登录
■ 制品内容 (Code No.: R161A)(50次量)
2×Gflex PCR Buffer (Mg2+, dNTP plus) 1.25 ml
Tks Gflex DNA Polymerase(1.25 units/μl) 62.5 U(50μl)
16S V3-V4 Primer Mix(10×) 125 μl
H2O 1 ml

 

■ 制品说明
本制品是使用Illumina公司MiSeq对细菌丛16S rRNA进行解析时使用的PCR扩增试剂盒。以细菌16S rRNA基因的V3-V4区域为对象,使用对多样序列能有效扩增的PCR酶Tks Gflex™ DNA Polymerase进行扩增。
引物是采用设计在常用的高效扩增区域(V3-V4)上的341F、806R(见图1),在引物的5’端连有Illumina MiSeq用的overhang序列。使用本试剂盒扩增得到PCR产物后,利用Nextera XT Index Kit (Illumina公司)制备MiSeq用文库。Nextera XT Index Kit中的引物能够在待测文库的两端接入测序用adaptor和用于区分各个被检测样品的Index序列(见图2)。
 
 
■ 保存
-20℃
 
■ 试剂盒以外需要准备的其他试剂、仪器等(主要用品)
· 核酸提取Kit
【粪便样品】
NucleoSpin DNA Stool (Code No. 740472.10/.50)等
【土壤样品】
NucleoSpin Soil (Code No. 740780.10/.50/.250)等
· PCR产物的纯化
Agencourt AMPure XP(Beckman Coulter公司,Code No. A63880/A63881/A63882)
0.2 ml磁力架:Magnetic Separator-PCR Strip(Code No. 635011)等
新配的80% 乙醇
溶出液(10 mM Tris-HCl, pH8.5)
· 测序adaptor与Index序列的添加
Nextera XT Index Kit(Illumina Code No. FC-131-1001/FC-131-1002)
Nextera XT Index Kit v2 set A-D(Illumina Code No. FC-131-2001~2004)
· PCR仪
TaKaRa PCR Thermal Cycler Dice™ Touch(Code No. TP350)
TaKaRa PCR Thermal Cycler Dice™ Gradient(Code No. TP600)等
· 凝胶电泳装置
Mupid-2plus(Code No. M-2P)
Mupid-exU(Code No. EXU-1)等
· 凝胶
Agarose L03「TAKARA」(Code No. 5003/5003B)
PrimeGel™ Agarose PCR-Sieve(Code No. 5810A)等
· 微量高速离心机
· 微量移液器及Tip
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