产品简介
在肝功能检查中,谷丙转氨酶是反映肝细胞受损的指标的,而天冬氨酸氨基转移酶是反映肝细胞坏死的标准。对于肝硬化、肝纤维化、肝癌的检测非常准确。可以和谷丙转氨酶结合起来反映肝功能的状况,比如谷丙转氨酶/天冬氨酸氨基转移酶比值均在1.0以下为肝硬化或早期肝硬化患者。
AST/GOT 能使α-酮戊二酸和天门冬氨酸移换氨基和酮基,生成谷氨酸和草酰乙酸。草酰乙酸在反应过程中可自行脱羧成丙酮酸。丙酮酸与 2,4 二硝基苯肼反应生成 2,4 二 硝基苯腙,在碱性溶液中显红棕色。比色后,查标准曲线,可求得酶的活力单位。
试剂的组成与配制
试剂一:谷草转氨酶基质液,50mL×1 瓶,4℃冰箱保存 6 个月;
试剂二:2,4—二硝基苯肼液,50mL×1 瓶,4℃冰箱保存 6 个月;
试剂三:4mol/L 氢氧化钠液,50mL×1 瓶,室温密封保存 6 个月;
0.4mol/L 氢氧化钠液的配制∶临用时按 4mol/L 氢氧化钠液∶双蒸水=1∶9 的比例稀释,需多少配多少,室温密封保存。
试剂四:2μmol/mL 丙酮酸钠标准液×1 支,4℃冰箱保存 6 个月;
试剂五:0.1mol/L 磷酸盐缓冲液×1 支,4℃冰箱保存 6 个月。
注意事项
1、严重脂血、黄疸或溶血血清可能会引起测定管吸光度增加,因此,检测此类标本时,应该做血清标本对照管。
2、一般血清标本内源性酮酸很少,血清对照管吸光度值接近试剂空白管(以 0.1mL 蒸馏水代替血清,其他和对照管同样操作)。所以,成批标本测定时,一般不需要每一标本都作本身血清对照管,以试剂空白管代替即可,但对超过正常的血清标本应进行复查,复查时,每份标本应作对照管。
3、当血清标本酶活力超过 150 卡门氏单位时,应将血清用生理盐水稀释 5 倍或 10 倍后进行测定。
4、加入 2,4-二硝基苯肼溶液后,应充分混匀,使反应完全,加氢氧化钠溶液方法要一致,不同方法会导致吸光度读数的差异。
5、比色法中常用的有赖氏(Reitman-Frankel)法及金氏(King)法。赖氏法标准曲线所定单位数,是用实验方法和卡门氏分光光度法(速率法)作对比测定求得的。以卡门氏单位报告结果,比较准确。 卡门氏单位定义:1mL 血清,反应液总容量 3mL,340nm 波长,1cm 光径,25℃,1min 内所生成的丙酮酸,使 NADH 氧化成 NAD+而引起吸光度每下降 0.001 为一个卡门氏单位。
6、血清中 AST/GOT 在室温(25℃)可保存 2 天,在 0~4℃可保存一周,在-25℃可保存 1 个月。
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