产品说明
结缔组织狭义上是指其含有的三种纤维:胶原纤维、网状纤维、弹力纤维、而胶原纤维(collagen fiber)是分布最广、含量最多的一种纤维。Masson 三色染色又称马松染色,是结缔组织染色中最经典的一种方法,是胶原纤维染色权威而经典的技术方法。所谓三色染色通常是指染胞核和能选择性的显示胶原纤维和肌纤维。该法染色原理与阴离子染料分子的大小和组织的渗透有关:分子的大小由分子量来体现,小分子量易穿透结构致密、渗透性低的组织,而大分子量则只能进入结构疏松的、渗透性高的组织。然而,淡绿或苯胺蓝的分子量很大,因此 Masson 染色后肌纤维呈红色,胶原纤维呈绿色或蓝色,主要用于区分胶原纤维和肌纤维。
Masson 试剂盒的特点
◆ 染色稳定;
◆ 分化时间短,1-2 秒;
◆ 色彩清楚鲜艳;
◆ 使用范围广,适宜于组织的石蜡切片、冰冻切片等染色;
◆ 所染切片保存时间长且不易褪色。
准备材料
固定液:选用甲醛升汞或甲醛盐溶液、蒸馏水、系列乙醇、二甲苯、染缸
使用说明
1.切片常规脱蜡至水。
2.A液染色 5min-10min。
3.B液分化、水洗。
4.水洗几分钟至返蓝。
5.C液染色 5-10min。
6.在上述操作过程中按 蒸馏水:D液=2:1 比例配置弱酸工作液,用弱酸工作液洗 1min。
7.E液洗 1-2min
8.用配置好的弱酸工作液洗 1min。
9.直接放入F液中染色 1-2min。
10.用配置好的弱酸工作液洗 1min。
11.95%乙醇快速脱水。
12.无水乙醇脱水 3 次,每次 5-10s。
13.二甲苯透明 3 次,每次 1-2min。
14.中性树胶封固。
染色结果:
注意事项
1.切片脱蜡应尽量干净。
2.取 A1、A2 等量混合,成为 Weigert 铁苏木素染色液,一般4小时失去染色能力。
3.组织固定起着非常重要的作用,使用不同的固定液可延长或缩短染色时间。
4.经典 masson 三色染色中,用 Harris 苏木精染核,但 Harris 苏木精染核后切片颜色不够鲜艳,本染液采用 Weigert 染细胞核,因为染色的目的主要在于区分胶原纤维和肌纤维,一般也可以省略该染色步骤。
5.酸性乙醇分化时间应该依据切片薄厚,组织的类别和新旧而定。
6.弱酸溶液可使色彩更清晰鲜艳,如使用量大可自行配置 0.1-0.3%乙酸溶液予以替代。
7.磷钼酸分化时要在镜下控制,分化到胶原纤维呈淡红色、纤维呈红色即可。分化时间根据染色深浅而定,一般 1-2min。
8.为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
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