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特点
- · 20分钟内快速纯化至多24个样本
- · 利用真空装置，可同时处理多个样本
- · 低洗脱体积确保高浓度DNA
- · 独特的洗涤缓冲液确保较低的内毒素水平
- · 适合多种应用
产品详情
QIAGEN Plasmid Plus Midi Kit 可超快速、大规模纯化获得至多250 μg的高纯度质粒DNA。使用真空装置可同时纯化至多24个样本，有效减少手动操作时间。低洗脱体积可获得高浓度质粒DNA，无需乙醇沉淀，即可直接应用。QIAGEN Plasmid Plus Midi Kit 含有新型的洗涤缓冲液，用于去除内毒素。纯化得到的质粒DNA适合多种应用，包括在敏感的细胞株中转染。
性能
稳定的质量和性能
QIAGEN Plasmid Plus技术可达到与阴离子交换技术相同的性能和品质。QIAGEN Plasmid Plus纯化柱独特的结合试剂确保得到高纯度质粒DNA。QIAGEN Plasmid Plus Midi Kit 提供高产量的实验方案和额外缓冲液，可获得多达250 μg高纯度质粒DNA，无RNA、蛋白质和基因组DNA等污染物。
转染级质粒DNA，内毒素水平低
内毒素，又名脂多糖或LPS，在纯化质粒过程的裂解步骤释放，是革兰氏阴性菌如E. coli细胞膜的组成部分。内毒素包括非特异性激活免疫反应，是转染实验的非可控变量，影响实验结果和重复性，使其难以比较和解释。
该试剂提供的洗涤液将内毒素水平降至1 EU/μg DNA以下。（依宿主菌、培养基和细胞密度的不同而不同。如果细胞密度很高，内毒素水平也略高，在1–3 EU/μg DNA范围内。） 这使得到的质粒DNA适合多种应用，包括在敏感细胞系中转染。
原理
QIAGEN Plasmid Plus Midi Kit 进行大规模质粒纯化，方便快捷。独特设计的QIAGEN Plasmid Plus纯化柱和创新的结合试剂，使其只需简单的结合–洗涤–洗脱过程。QIAGEN Plasmid Plus Midi Kit 可在20分钟内实现快速大规模的质粒制备。无需乙醇沉淀可直接用于下游各种应用。该质粒DNA适用于要求小体积量的应用。
使用LyseBlue试剂，产量最大化
该试剂盒也包含LyseBlue指示剂，用于指示最佳的缓冲液混合状态。通过简单的颜色变化，就可避免常见的手动操作失误，防止细胞裂解不充分及SDS、基因组DNA和细胞碎片沉淀不完全。这种独特的缓冲液添加剂确保了细胞充分裂解和完全中和，使产量最大化。
操作流程
QIAGEN Plasmid Plus Kits提供的QIAfilter试剂条能快速澄清裂解液。一步即可将裂解液装入柱中，节约时间。使用真空装置（如QIAvac 24 Plus）抽吸澄清的裂解液及后续的洗涤缓冲液，使其流过QIAGEN Plasmid Plus离心柱。将膜洗涤和干燥后，即可通过离心获得高浓度DNA（参见下图）。
应用
QIAGEN Plasmid Plus Midi Kit 纯化得到的转染级质粒DNA适合多种应用，例如：
- · 转染多数细胞系（敏感细胞系如Huh-7）
- · 限制性酶切
- · 克隆
- · 体外转录和翻译
- · 测序
参数
| 点 | 参数 |
| Applications | Transfection of most cell lines, cloning, enzymatic restriction, in-vitro translation/transcription, sequencing |
| Comment | Ultrafast and low hands-on parallel purification of ultrapure plasmid DNA with very low endotoxin levels. High DNA concentration without alcohol precipitation. |
| Culture volume/starting material | 25-50 ml |
| Description | For ultrafast purification of up to 250 µg (Plasmid Plud Midi Kit), up to 1 mg (Maxi Kit), up to 2,5 mg (Mega Kit) or up to 10 mg (Giga Kit) Transfection Grade Plasmid DNA |
| Final DNA concentration | ≥ 1 µg/µl |
| Plasmid type | Plasmids, cosmids |
| Processing | manual (centrifugation and vacuum), parallel processing |
| Samples per run; throughput | 1-24 samples per run |
| Technology | Advanced Silica technology (non-chaotrophic), Endotoxin reduction |
| Time per run or prep per run | 20 min |
| Yield | up to 250 µg |
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