产品简介
与 mRNA 相比,lncRNA 具有丰度低、GC含量差异大、二级结构更复杂等特性,传统定量试剂对 lncRNA 难以达到理想的效果。本试剂盒中的 2×lnR lncRNA PreMix 是专门为 lncRNA 定量检测而研发的新一代预混形式的荧光定量 PCR 检测试剂,其中的DNA Polymerase 采用的是抗体修饰的热启动形式,确保本产品在保证较高的反应特异性的情况下具有更高的检测灵敏度。此外,Buffer 中添加了的 H-competitor 因子和 EP 组分,使得本产品具有广泛的样本普适性,对不同GC含量的模板、具有复杂高级结构的模板、PCR 抑制剂残留较多的模板以及长片段模板等具有非常好的扩增适用性,特别适合高级结构相对复杂,整体丰度相对较低的 lncRNA 的定量检测。
产品特点
■ 高灵敏的抗体修饰聚合酶,适用快速定量流程,高效完成 lncRNA 检测
■ H-Competitor 因子竞争氢键,完美解决高 GC 和复杂IncRNA模板
■ EP PCR 组分稳定体系,有效的保护酶活,抵御各种抑制剂的干扰
下游应用
特别适用于在各类荧光定量仪器上采用 SYBR Green 法进行lncRNA GC 表达分析的实验,也适合高 、复杂二级结构、杂质残留量高及长片段 cDNA 模板定量时使用。
实验结果
图1:提取拟南芥总RNA,分别使用TIANGEN KR202+FP402及国外A 公司提供的解决方案( 使用mRNA 反转定量试剂) 检测lncRNA COOLAIR,展示扩增曲线、熔解曲线、标准曲线和Ct 值。
结果显示,TIANGEN lncRNA 专属检测试剂扩增Ct 靠前,特异性高,梯度优秀,优于A 公司的mRNA 通用试剂。NTC:阴性对照。ND:未检出。
图2:分别提取人类(左)、小鼠(中)和大鼠(右)总RNA,分别使用TIANGEN KR202+FP402(蓝色线)及国内B 公司提供的解决方案(使用mRNA反转定量试剂,红色线)检测lncRNA ( 人类:HEIH,小鼠:NONMMUT000882,大鼠:NONRATT000076),展示扩增曲线和熔解曲线。结果显示,TIANGEN lncRNA 专属检测试剂扩增Ct 靠前,特异性高,具有良好的物种普适性,优于B 公司的mRNA 通用试剂。