产品简介
lnRcute lncRNA cDNA 第一链合成试剂盒是专门针对长链非编码RNA(lncRNA)反转录而开发的产品。与 mRNA 相比,lncRNA具有丰度低、GC 含量差异大、二级结构更复杂等特性,传统反转录试剂对 lncRNA 难以达到理想的效果。本试剂盒含有高效去除基因组 DNA 的 gDNase,可有效避免残留的基因组 DNA 对后续检测结果的干扰。本试剂盒中 lnR RT Enzyme Mix 中使用的反转录酶为 FastKing RT Enzyme,此酶是通过分子改造后的新型反转录酶,特别增加了疏水 motif,具有更强的 RNA 亲和性和热稳定性,使本试剂盒在通读 GC 含量高,二级结构复杂,低丰度的 RNA 模板和抗逆性等方面表现突出,特别适合表达水平相对较低,二级结构相对复杂的 lncRNA 的反转录反应。
产品特点
■ 高效:稳定高效的 King 反转录酶,反转效率超过 95%
■ 灵敏:缓冲液中加入提升灵敏度的组分,检测下限可达 0.1 ng total RNA
■ 快速:21 min 高效制备无基因组残留的 cDNA
■ 抗逆:无惧复杂模板,完美抵御杂质干扰
下游应用
反转录后的cDNA可用于IncRNA的荧光定量PCR使用,亦可用于mRNA的常规PCR,荧光定量PCR,cDNA文库构建等实验。
实验结果
提取拟南芥总RNA,分别使用TIANGEN KR202+FP402及国外A 公司提供的解决方案 ( 使用mRNA 反转定量试剂) 检测lncRNA COOLAIR,展示扩增曲线、熔解曲线、标准曲线和Ct 值。
结果显示,TIANGEN lncRNA 专属检测试剂扩增Ct 靠前,特异性高,梯度优秀,优于A 公司的mRNA 通用试剂。NTC:阴性对照。ND:未检出。
分别提取人类(左)、小鼠(中)和大鼠(右)总RNA,分别使用TIANGEN KR202+FP402(蓝色线)及国内B 公司提供的解决方案(使用mRNA反转定量试剂,红色线)检测lncRNA ( 人类:HEIH,小鼠:NONMMUT000882,大鼠:NONRATT000076),展示扩增曲线和熔解曲线。结果显示,TIANGEN lncRNA 专属检测试剂扩增Ct 靠前,特异性高,具有良好的物种普适性,优于B 公司的mRNA 通用试剂。
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