产品简介

NADK（EC 2.7.1.23）广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞中，是目前所发现的生物体内唯一能够催化 NAD+磷酸化生成 NADP+的酶，可催化 NAD(H)以 ATP 或无机多聚磷酸[poly(P)]作为磷酰基供体进行磷酸化反应，生成 NADP(H)。因此，NAD 激酶在合成 NADP(H)以及调节 NAD(H)与 NADP(H)的平衡上具有重要作用。

NADK 催化 NAD+磷酸化，生成 NADP+；NADP+可被 6-磷酸葡萄糖脱氢酶还原为 NADPH；NADPH 通过PMS的递氢作用，还原氧化型噻唑蓝（MTT），通过其在 570nm 的吸光值大小可反映出 NADK 活性的大小。

溶液的配制

1、 试剂三：用时加入 3 mL 双蒸水，充分溶解，可分装保存，-20℃保存两周，禁止反复冻融；临用前取出一支稀释 100 倍使用。

2、 试剂四：用时加入 1 mL 双蒸水，充分溶解，4℃保存；

3、 试剂五：用时加入 2 mL 双蒸水，充分溶解，4℃保存；

4、 试剂六：用时加入 2 mL 双蒸水，充分溶解，4℃保存；

5、 试剂七：用时加入 2 mL 双蒸水，充分溶解，4℃避光保存；

6、 试剂八：液体置于试剂瓶内 EP 管中。临用前加入 0.986 mL 蒸馏水充分溶解，可分装后-20℃保存，禁止反复冻融；

7、 试剂十：自备 95%乙醇；

8、 标准品：加入 1.9 mL 蒸馏水，即得 2 μmol/mL NADP 标品。临用前稀释 100 倍得 20 nmol/mL NADP 标准溶液备用。

注意：实验之前建议选择 2-3 个预期差异大的样本做预实验。如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。

需自备的仪器和用品

台式离心机、可见分光光度计/酶标仪、水浴锅、微量玻璃比色皿/96孔板、可调式移液枪、研钵/匀浆器、无水乙醇、冰和蒸馏水。