镍琼脂糖凝胶6FF

货号:CS20361
品牌:Coolaber
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产品说明

金属螯合亲和层析介质,又称固定金属离子亲和色谱,其原理是利用蛋白质表面的一些氨基酸,如组氨酸能与多种过渡金属离子如Cu2+,Zn2+,Ni2+,Co2+,Fe3+发生特殊的相互作用,能够吸附富含这类氨基酸的蛋白质,从而达到分离纯化的目的。因此,偶联这些金属离子的琼脂糖凝胶就能够选择性地分离出这些含有多个组氨酸的蛋白以及对金属离子有吸附作用的多肽、蛋白和核苷酸。一般来说,Ni2+是用于纯化组氨酸标记的蛋白质的优选金属离子。半胱氨酸和色氨酸也能与固定金属离子结合,但这种结合力要远小于组氨酸残基与金属离子的结合力。镍-琼脂糖凝胶6FF具有特异性好、流速快等优点。

 

性能参数

检测条件:层析柱16mm×200mm,柱床高5cm,25℃

 

注意事项

1.请勿在-20ºC或更低温度冻存本产品。

2.本产品使用过程中,缓冲试剂如Tris、HEPES、MOPS等的浓度不宜超过100mM,SDS和sarkosyl的浓度不宜超过0.3%,Triton X-100、Tween-20、NP-40的浓度不宜超过2%,脱氧胆酸钠、CHAPS的浓度不宜超过1%,组氨酸浓度不宜超过20 mM,钙离子浓度不宜超过5 mM。钠离子和镁离子浓度可以高达2 M,盐酸胍浓度可以高达6 M,尿素浓度可以高达8 M,甘油浓度可以高达50%。本产品不能耐受还原剂、螯合剂和强酸强碱。其它未提及试剂的兼容性可以参考上述试剂,但还有待实验验证。

3.保存和纯化过程中应始终保持凝胶湿润。

4.若离心不能完全除去蛋白样品中的不溶物,可以将样品溶液用0.45μm的滤膜过滤。

5.蛋白样品收集后宜尽快完成纯化工作,并应始终放置在4ºC或冰浴,以减缓蛋白降解。为有效抑制蛋白降解,可以在裂解液中添加适量的蛋白酶抑制剂。

6.若使用本说明书提供的条件无法达到理想的纯化效果,可尝试改变洗涤液和洗脱液中咪唑的浓度或其pH,以达到最优效果。

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