■ 制品内容 (100 μl PCR×100次或50 μl PCR×200次) |
TaKaRa Taq*1 (5 U/ μl) | 50 μl (250 U) | dNTP Mixture*2 (各2.5 mM) | 1.28 ml | 10 × PCR Buffer (Mg2+ plus) 100 mM Tris-HCl(pH8.9) 500 mM KCl 15 mM MgCl2 | 1 ml | 10 × PCR Buffer (Mg2+ Free) 100 mM Tris-HCl(pH8.9) 500 mM KCl | 1 ml | MgCl2 (25 mM) | 1 ml | Control Template (1 μg/ml λ DNA) | 100 μl | Control Primer 1*3 (20 pmol/μl) | 50 μl | Control Primer 2*3 (20 pmol/μl) | 50 μl | Control Primer 3*3 (20 pmol/μl) | 50 μl | λ-EcoT14 I Marker*4 (100 ng/μl) | 40 μl | 6 × Loading Buffer*5 | 1 ml | | | *1 TaKaRa Taq™酶说明 (5 U/μl) | 【酶贮存液】 | 20 mM Tris-HCl(pH8.0),100 mM KCl,0.1 mM EDTA,1 mM DTT,0.5% Tween20,0.5% NP-40,50% Glycerol。 | 【活性定义】 | 用活性化的大马哈鱼精子DNA作为模板/引物,在74℃、pH9.3、30分钟内,摄入10 nmol的全核苷酸为酸性不溶物的活性定义为1个活性单位 (U)。 | 【Reaction mixture】 | 25 mM | | TAPS (pH9.3,25℃) | 50 mM | | KCl | 2 mM | | MgCl2 | 0.1 mM | | DTT | 200 μM | | each dATP·dGTP·dCTP | 100 μM | | [3H]-dTTP | 0.25 mg/ml | | activated salmon sperm DNA | | | *2 dNTP Mixture (各2.5 mM) | dNTP Mixture无需稀释,可直接用于PCR。 Form:溶于水 (钠盐),pH7-9 纯度:每种dNTP≥98% | | *3 Control Primer序列 | Control Primer 1 | 5'-GATGAGTTCGTGTCCGTACAACT-3' | Control Primer 2 | 5'-CCACATCCATACCGGGTTTCAC-3' | Control Primer 3 | 5'-GGTTATCGAAATCAGCCACAGCGCC-3' | | * 使用Control Primer 1、2时,可以扩增Control Template (λ DNA)的6,012 bp DNA片段。使用Control Primer 1、3时,可以扩增Control Template (λ DNA)的500 bp DNA片段。 | | *4 λ-EcoT14 I Marker | 此marker是用限制性内切酶EcoT14 I分解λcl857 Sam7 DNA得到的。由DNA片段19,329 bp;7,743 bp;6,223 bp;4,254 bp;3,472 bp;2,690 bp;1,882 bp;1,489 bp;925 bp;421 bp;74 bp等组成。由于λ DNA分解的末端片段与COS end相连,需加热处理(60℃,5 min.)。 | | *5 6×Loading Buffer的组成 | 36% | | 甘油 | | 30 mM | | EDTA | | 0.05% | | 溴酚兰 | | 0.035% | | 二甲苯青 | | | | |
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■ 制品说明 |
PCR Amplification Kit适用于各种DNA模板的PCR扩增。本试剂盒含有λ DNA作为对照模板以及扩增λ DNA目的序列用的对照引物 (6,012 bp,500 bp) 。 | | ■ 保存 | -20℃。 | | |
■ 使用注意 |
以下为使用本试剂盒时的注意事项,使用前一定认真阅读。 1. 试剂盒中的各组份,要仔细混匀后使用,但TaKaRa Taq要避免剧烈操作。 2. 因为样品DNA的提取方法不同,10×PCR Buffer (Mg2+ plus)中的Mg2+浓度可能并非最适浓度,此时可使用10×PCR Buffer (Mg2+ Free)和MgCl2,调整PCR反应液的适合的Mg2+浓度。 |
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