产品简介

粪便样品DNA保存液可以在室温条件下保存DNA 样品。它能迅速渗入细胞内，通过抑制DNase的活性而达到保护DNA的完整性的目的。

适用于不能及时进行DNA提取的粪便样品的采集。   

使用方法

一、批量自采：

1、采便管准备

1）患者采样盒中包括：采便管2管（每管装有7.5ml保护液以及6-8颗玻璃珠），冰袋3个。

2）患者回家后，需将冰袋放入冰箱冷冻层，并在送样当天进行采便。

2、采便方式：

1）准备一张纸在排便时将大便与便池水隔绝；

2）采便时取中部未沾染便池水和尿液的大便；

3）用采便管中的小勺挖取粪便，放入采便管中，盖紧管盖，放入采样盒中；

注意：2个采便管都需要挖取粪便，每管挖取3-4勺粪便；

4）从冰箱冷冻层中取出冻好的冰袋，放入蓝色采样盒中，以保持样品低温环境，并尽快送回医院。

二、少量自采

在粪便样品中加入3-5倍体积的粪便样品DNA保存液。

保存时间说明

1、实测粪便样品DNA保存液，于4℃可稳定保存DNA 15-30天；于室温（≤30℃）可稳定保存DNA 7-15天。

2、如需长期保存，可在粪便DNA提取步骤3中弃上清后直接-20℃或-80℃长期冻存。

粪便DNA提取：

1：取200μL样品匀浆至拧盖的2mL 离心管。

样品匀浆制备： 1）将采便管用用漩涡震荡器，混匀至无块状；

2）用1mL注射器接1mL枪头搅拌；

3）枪头（1mL）减去1cm左右，吸之前摇匀，尽量吸取内容物，否则提取的DNA量过少；

2：加入1 mL PBS，用旋涡振荡器混合均匀，离心（15000rpm,5min,4℃） 。

3：弃1mL 上清，重复2一次。

4：弃950μL上清后，加入300μL Tris-SDS,500μL Tris-饱和酚，移入已加入0.33-0.35g玻璃珠（φ0.1mm）的2mL圆底离心管中。

5：震荡呈乳白色，在均质(Beat-Bitter)中均质45s，离心（15000rpm,5min,4℃）。

6：将上层悬浊液400μL（2×200）转移到一个新的离心管中（圆头），加入200μL Tris-酚，200μL 氯仿/异丙醇（24：1）注：中间白色为变性蛋白相不能碰。

7：手摇（10-20次）（上下颠倒即可，轻柔），混匀呈白色，离心（15000rpm,5min,4℃）。

8：将250μL（2×125）上层悬浊液转移到新的1.5mL离心管中，加入25μL 3M的乙酸钠（pH=5.2）,加入300μL 异丙醇，手摇混匀后离心（15000rpm,5min,4℃）。-20℃静置20min.

9： 弃上清 （直接倒掉即可），加入500μL 70% 乙醇，手摇混匀，离心（15000rpm,5min,4℃）。

10：弃上清（直接倒掉即可），离心（12000rpm,1min,常温），用枪头（斜）吸去多余液体，开盖，室温干燥15min。

11：加入100μL TE, 5μL RNA酶，轻弹混匀，小离心机轻微离心（到6000rpm立即停止），37℃恒温箱静置10min.

12：测定浓度及电泳。