产品说明

 D-荧光素（D-Luciferin）是萤火虫荧光素酶底物，其量子效率为0.88，是Luminol的20倍。反应原理为镁离子存在下荧光素酶使荧光素与ATP反应，接着它被氧化形成二氧杂环丁烷结构并发出黄绿色的光。Luciferin-luciferase发光用于ATP监控以测定细胞活力以及细菌计数。它还用于报告基因检测。可与小动物活体成像系统配套使用，用于标记LUC基因后的体内活体荧光检测。也应用于体外分析，高通量测序和各种污染检测。

D-荧光素有三种产品形式，D-荧光素（D-Luciferin, free acid）、D-荧光素钾盐（D-Luciferin, potassium salt）和D-荧光素钠盐（D-Luciferin, sodium salt），三种形式都易溶于水，在绝大多数的应用上都没有实质性的差别。它们的激发和发射波长分别为328nm和533nm。

使用方法（仅供参考）

（一）活体成像分析方法

1.用DPBS（不含Mg2+、Ca2+）配制15 mg/mL的D-Luciferin工作液，0.2 μm滤膜过滤除菌。

2.注射量10 μL/g的体重，如10 g重小鼠，注射100 μL工作液（1.5 mg D-Luciferin）。

3.腹腔注射10-15分钟后，上机进行图像分析。

（二）体外分析方法

1. 用无菌水配置200×的D-Luciferin储备液（30 mg/mL），立即使用，或-20℃保存。

2. 用预热好的完全培养基1:200稀释D-Luciferin储备液，配制150 μg/mL工作液。

3. 去除细胞培养基。

4. 向细胞中添加1×的D-Luciferin工作液，37℃孵育5-10 min，进行图像分析。

注意事项

1.钙镁离子可能会抑制荧光素酶的活性，镁离子可能会对荧光素的氧化造成影响，溶解D-Luciferin应使用无钙镁离子的PBS，且要完全溶解。

2.本品要进行避光操作和保存。储存液过滤除菌后可分装于-20℃或-80℃冻存。

3.动物类型体重，以及注射方式都会影响信号的发射，建议每次实验都要做荧光素酶动力学曲线，确定最佳信号平台期和最佳的检测时间。

4.在体外图像分析前，将细胞进行37℃的短时间培养可以增加信号强度。

5.进行ATP的检测，尽量避免外源ATP的污染。