2×KOD MasterMix(无染料)

2×KOD MasterMix(Without dye)
货号:SL2651
品牌:Coolaber
纯度:N/A
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SL2651-5×1mL 5×1 mL ¥498.00 请登录 请登录

产品简介

KOD聚合酶融合SSB基因改造后,连接表达载体在大肠杆菌中经诱导表达分离纯化而来。具有5'→3'聚合酶活性和3'→5' 外切核酸酶活性,能校对DNA扩增过程中产生的碱基错配。改造后保真度更高,扩增速度更快。同时对PCR抑制剂有较高的耐受性,比如可以在含20%血液中扩出基因,KOD 聚合酶延伸速度是于Taq DNA Polymerase 6倍。PCR产物为平端,可直接克隆于平滑末端的载体中,也可用Taq聚合酶加A处理再与T载体连接。适合于扩增保真度要求较高的片段,一般为6kb/min,扩增长度可以达到20kb。保真性是普通taq酶的150倍。

注意:不含染料的Mix要补加Loading buffer。

 

产品用途

高保真PCR扩增、平末端克隆、定点突变、复杂模板扩增、高GC模板扩增、血液直扩等。

 

为克服低效率扩增或不扩增,以下意见可供参考:

1. 优化退火温度。一般TM值减5℃,高于60℃以上建议使用60℃;减少反应过程中的扩增抑制剂。DNA模板中可能含有扩增抑制剂,减少模板的量提高扩增效率或提纯模板DNA的纯度。

2. 减少反应过程中的扩增抑制剂。DNA模板中可能含有扩增抑制剂,减少反应体系中模板的量提高扩增效率。

3. 提高模板DNA的纯度和浓度。

4. 增加添加物。添加PCR增强剂(如DMSO 或Btaine)可以提高扩增效率,添加稳定剂(如BSA)能帮助克服扩增失败。

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