广谱蛋白酶抑制剂混合物(含EDTA)(100×)

货号:AR1193
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产品货号AR1193
产品名称广谱蛋白酶抑制剂混合物(含EDTA)(100×)
价格规格

广谱蛋白酶抑制剂混合物       1ml×5(100×)     

0.1M EDTA                          1ml×5(100×)

产品保存-20℃保存,一年有效
产品说明

细胞或组织提取物等样品中含有许多内源性的蛋白酶、磷酸酶等,容易导致提取物中的蛋白降解或去修饰,从而影响后续的蛋白检测。因此在提取物等样品中添加适当的蛋白酶、磷酸酶等抑制剂是防止蛋白降解和去修饰的有效方法。本产品可以有效抑制常规细胞或组织提取物中的各种蛋白酶活性,如丝氨酸蛋白酶、氨基肽酶、半胱氨酸蛋白酶、苏氨酸和天冬氨酸蛋白酶、金属蛋白酶等。

应用领域

本产品适用于原代细胞,培养的哺乳动物细胞,动物组织,植物组织,酵母或细菌细胞等裂解物制备过程中蛋白的保护。

使用方法

本蛋白酶抑制剂混合物为100×的储存液,使用时按照1:100的比例加入到裂解液中(例如,1ml裂解液中加入10μl蛋白酶抑制剂混合物),混匀后即可使用。含有蛋白酶抑制剂混合物的裂解液宜现用现配,不宜配制后冻存待后续使用。根据需要,0.1M的EDTA也按照1:100的比例加入到裂解液中。待所需的抑制剂添加完毕并混匀后,就可以开始进行常规细胞或组织的裂解和蛋白提取。

注意事项

1.传统的蛋白酶抑制剂(E-64, AEBSF, bestatin, leupeptin and aprotinin)是不能够抑制某些去泛素化(DUB)蛋白酶(例如ATAXIN-3)的功能的。

2.本产品以DMSO为溶剂,操作时注意防护。

3.本产品使用前室温平衡至溶解。

4.本产品使用前需震荡,以保证各成分均匀。

5.本产品可以适当分装后保存,并应在临使用前添加到裂解液等适当溶液中。

6.如用于检测金属蛋白酶活性,2D电泳以及IMAC,则不宜添加EDTA。

结果实例
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如图:在加入和不加入博士德蛋白酶抑制剂的情况下,利用博士德的组织提取液提取不用小鼠组织的蛋白时,各组织提取液中酶的活性。

附加说明

广谱蛋白酶抑制剂混合物成分说明:

抑制剂成分                             抑制对象

E-64                                      抑制半胱氨酸蛋白酶,不可逆

AEBSF-HCI                          抑制丝氨酸蛋白酶,不可逆

bestatin                                 抑制氨基肽酶,可逆  

leupeptin                               抑制丝氨酸和半胱氨酸蛋白酶,可逆

aprotinin                                抑制丝氨酸蛋白酶,不可逆

Pepstatin                               抑制天冬门氨酸蛋白酶,可逆

EDTA                                     抑制金属蛋白酶,可逆



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