产品简介
细胞核提取试剂盒(Nuclear Extraction Kit)本试剂盒提供了一种简单、方便的从动物细胞或组织中分离出完整而纯化的细胞核的方法,适合于动物肝和脑组织、肌肉、以及培养细胞的细胞核的制备,可用于细胞凋亡、信号传递、代谢和蛋白组学等研究。
产品内容
使用说明
1.样本处理
①组织:称取 100-200 mg 新鲜组织,使用生理盐水或 PBS 冲洗 2-3 次,滤纸吸干水分,将组织剪为碎块放入微量玻璃匀浆器中,加入 1.0 mL Lysis Buffer(冰上预冷)和 50 μL Reagent A,冰浴研磨 20-30 次,即为组织匀浆液。(注:若有未研开组织,可用双层纱布进行过滤);
②培养细胞:消化细胞后使用 PBS 洗涤,800 g 离心 10 min 收集细胞 5×107 个细胞,加入 1.0 mLLysis Buffer(冰上预冷)重悬细胞,再加入 50 μL Reagent A,将细胞悬液转移至微量玻璃匀浆器中,冰浴研磨 20-30 次,即为细胞匀浆液。
2.提取过程
①将组织/细胞匀浆液转移至离心管中,4℃ 700 g 离心 5 min,弃上清,留沉淀,沉淀中加入 0.5mL Lysis Buffer(冰上预冷),即为细胞核重悬液;
②取另一离心管中加入 0.5 mL Medium Buffer,将细胞核重悬液加至 Medium Buffer 之上(沿管壁缓慢加入离心管中),4℃ 700 g 离心 5 min,弃上清,留沉淀,沉淀中加入 0.5 mL Lysis Buffer 重悬细胞核沉淀,4℃ 1000 g 离心 10 min,弃上清,留沉淀,即为纯化后的细胞核沉淀;
③使用 50-100 μL Store Buffer 重悬细胞核沉淀,置于-80℃保存。
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