产品简介
ME广泛存在于微生物、培养细胞、动物和植物胞浆中,尤其在植物组织中活性较高。ME催化苹果酸氧化脱羧的可逆反应,产生丙酮酸和CO2,以及伴随NAD(P)+的还原反应,是苹果酸代谢的关键酶。ME活性与生物合成和抗氧化密切相关。近年来植物ME活性测定较多,已经成为抗氧化研究的热点。根据辅酶专一性和对底物特异性的不同,可将ME分为NAD-ME(EC1.1.1.38)和NADP-ME(EC1.1.1.40)。
NAD-ME催化NAD+还原成NADH,在340nm下测定NADH增加速率。
溶液的配制
1、 试剂二:临用前加入 20 mL 提取液充分溶解备用;
2、 试剂三:临用前每支加 1 mL 双蒸水充分溶解备用;
3、 试剂四:用时每支加 500 μL 双蒸水充分溶解备用;
4、 工作液:在 15 mL 试剂二中加入 2 mL 试剂三和 1 mL 试剂四,可以根据比例现用现配。
注意:实验之前建议选择 2-3 个预期差异大的样本做预实验。如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。
需自备的仪器和用品
紫外分光光度计、低温离心机、水浴锅、可调节移液器、1mL石英比色皿、研钵/匀浆器、蒸馏水。
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