产品简介
TIANSeq HiFi Amplification Mix 是一种新型高保真 PCR扩增预混液,适用于高通量测序文库的 PCR 扩增和其他PCR 相关的克隆和检测。
扩增预混液中的 Ultra HiFi DNA Polymerase 是通过定向分子进化技术开发得到的新型快速高保真 DNA 聚合酶,增强了 DNA 聚合酶对模板的亲和力,使得此酶在扩增速度和延伸能力上得到了提升,增加了 PCR 成功率和产物量。同时,此酶具有优良的 3’- 5’外切酶活性(Proof- reading 活性),保真性可达市场上主流产品水平,保证了基因和文库扩增过程中的真实性。此外,本产品中的 DNA 聚合酶具有热启动(Hot Start)功能,可有效的控制低温情况下的非特异扩增和酶活损耗,进而保证了PCR 扩增的特异性和稳定性。除此之外,预混 Mix 中还整合了 PCR 反应增强系统,不但提高了预混 Mix 的稳定性,使得聚合酶对 PCR 反应抑制剂的耐受能力增强,还提高了 Ultra HiFi DNA Polymerase 对不同 GC 含量模板的适应能力,使得本产品具有广泛的样品普适性和模板投入范围,有效降低 PCR 反应的偏好性。
产品特点
■ 高效扩增—保证最终成库量,降低扩增循环数
■ 低偏好性—对不同 GC% 的 DNA 模板具有均衡的扩增效率
■ 高特异性—真正具有热启动性,特异性强
■ 高保真性—保真性为 Taq DNA 聚合酶的 50 倍
■ 高灵敏度—模板用量可低至 1 pg
下游应用
二代测序文库 PCR 富集、一代测序 PCR 扩增、高保真克隆、SNP 检测、定点突变等。
适用范围
用于DNA的高保真快速扩增,如基因表达克隆、基因定点突变、基因组点突变的分析 (SNP)等;更可用于高通量测序中,如高保真基因组DNA文库的富集。
实验结果
成 库 量
使用 TIANGEN UltraHiFi 酶和国外 K 公司、N 公司的专门用于 NGS 文库富集的高保真酶同时进行不同 GC比的基因组DNA 的文库富集(基因组使用量为 10 ng,富集 8 个循环),使用 Agilent 2100 检测库容。结果显示,TIANGEN UltraHiFi 酶富集文库的库容较高,对不同 GC 的核酸的普适性强,文库富集性能优于竞品。
GC偏好性
使用TIANGEN UltraHiFi 酶和国外K 公司、N 公司的专门用于NGS 文库富集的高保真酶同时富集不同GC 比的基因组文库,测序后分析文库均一性。结果显示,TIANGEN UltraHiFi 酶富集文库的均一性较好,无GC偏好性,与K 公司结果相当,略优于N 公司产品。
测序数据
使用TIANSeq HiFi酶和国外K公司、N公司的专门用于NGS文库富集的高保真酶同时进行同一基因组DNA的文库富集(基因组使用量为10 ng),测序后分析文库覆盖度和重复率。结果显示,TIANSeq HiFi酶富集文库的覆盖度较高,重复率满足要求,文库富集性能与竞品相当。