细胞透膜液(0.1% Triton)

货号:SL6499
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SL6499-500mL 500 mL ¥98.00 请登录 请登录

产品说明

细胞透膜液可以用于免疫染色等多种原位检测时细胞样品、冰冻或石蜡切片的通透处理,有助于暴露抗原、核酸等作用靶点,使抗体、探针或标记物等更容易进入细胞内,从而确保并增强染色等的检测效果。本产品为即用型工作液,可以直接使用,无需稀释。

本产品推荐用于各种常规的免疫荧光、免疫组化、免疫细胞化学、流式检测等实验中细胞的通透,对于需要检测细胞膜蛋白的情况推荐使用Saponin 通透液。

Triton X-100是常用的通透试剂,可以通透细胞膜和核膜,作用的原理也是非特异性地溶解细胞膜,因此其缺点是不利于膜蛋白的检测,但当使用多聚甲醛进行交联和固定后,相当一部分膜蛋白会被交联固定,从而不会被Triton X-100溶解, 因此后续仍然能检测到。Saponin可以特异性地溶解细胞膜中的胆固醇,从而实现在细胞膜上选择性地打孔,其优点是适合于细胞膜蛋白的检测,特别适合通过流式细胞仪检测细胞膜上的标志性蛋白,缺点是对于一些胆固醇含量低的细胞通透效果差,通透效果弱于Triton X-100和有机溶剂,并且不能通透胆固醇含量很低的核膜和线粒体膜。对于凝集素(lectin)的检测, 含Triton X-100等非特异性去垢剂的通透液的效果显著优于主要含Saponin的通透液。

本细胞透膜液中含有Triton X-100等去垢剂,配制在PBS中。

 

使用说明

1. 对于切片,在固定、洗涤结束后,每样滴50-100μL免疫染色强力通透液,也可以在染色缸中完全浸没进行通透。

对于细胞样品,在固定、洗涤结束后,按照六孔板每孔加入1mL免疫染色强力通透液,其它多孔板参考该比例加入。

对于其它样品,加入免疫染色强力通透液的量以充分盖住样品为准。 

2. 通常在免疫染色强力通透液中室温孵育5-10分钟,即可完成通透。对于较难通透的样品或者要求通透特别充分的情况,可以在免疫染色强力通透液中室温孵育10-30分钟。

 

注意

通透步骤只在检测细胞内抗原表位的时候才需要,因为抗体需要进入细胞内部去检测蛋白。但是,如果待检测的是跨膜蛋白,且其抗原表位处于胞质内区域,则同样需要对细胞进行通透。相反,如果所检测的抗原表位位于膜蛋白的胞外段,则不需要进行通透。丙酮本身具有通透作用,因此用丙酮作为固定剂时是不需要通透的。甲醇同样具有通透作用,但有些场合并不适合用甲醇,因为一些表位对甲醇非常敏感。

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