产品简介

ACK广泛存在于生物体内，催化乙酸和ATP生成乙酰磷酸和ADP，是细菌碳代谢和能量代谢的关键酶，尤其 是在古细菌甲烷合成代谢中起着中枢作用。

测定原理如下：

（1）ACK催化乙酸钠和ATP生成乙酰磷酸和ADP，（2）丙酮酸激酶催化ADP和PEP生成ATP 和丙酮酸，（3）乳酸脱氢酶催化丙酮酸和NADH生成乳酸和NAD+，（4）在340nm下测定NADH氧化生成NAD+速率，即可反映ACK活性。

溶液的配制

1、 提取液：临用前将试剂九加入到提取液中，并于 4℃保存；

2、 试剂二：临用前每瓶加入 4 mL 双蒸水，充分溶解待用。用不完的试剂仍 4℃保存；

3、 试剂三：临用前每瓶加入 3 mL 双蒸水，充分溶解待用；用不完的试剂-20℃保存；

4、 试剂四：临用前每瓶加入 2 mL 双蒸水，充分溶解待用；用不完的试剂-20℃保存；

5、 试剂五：临用前每支加入 1 mL 双蒸水，充分溶解待用；用不完的试剂-20℃保存；

6、 试剂六：液体置于试剂瓶内 EP 管中。临用前根据样本量将试剂六、蒸馏水按 43:457（V:V）的比例配制 备用，现用现配；

7、 试剂七：液体置于试剂瓶内 EP 管中。临用前根据样本量将试剂七、蒸馏水按 1:9（V:V）的比例配制备用， 现用现配；

8、 试剂八：临用前加入 5 mL 双蒸水，充分溶解待用。用不完的试剂仍 4℃保存；

9、 工作液：吸取 0.3 mL 试剂二、1 mL 试剂三、0.65 mL 试剂四、0.2 mL 试剂五、0.2 mL 试剂六、0.2 mL 试剂七、1 mL 试剂八混匀，也可根据比例现用现配，于冰上备用。

注意：实验之前建议选择 2-3 个预期差异大的样本做预实验。如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者 增加样本量进行检测。

需自备的仪器和用品

台式离心机、紫外分光光度计、水浴锅、1mL石英比色皿、可调式移液枪、研钵/匀浆器、冰、蒸馏水。