产品简介
内毒素(即 lipopolysaccharides,LPS)是 E.coli 细胞壁的主要成分,本产品适用于DNA、RNA、蛋白质等其他生物样品。不影响 DNA 和绝大部分蛋白质的活性,处理过的质粒 DNA 可用于转染实验。
使用方法
1. 用于体积小于 500 uL 的 DNA/RNA 样品(大于500 uL扩大反应体积)
1) 在一干净的离心管中加入 500 uL 的样品。如果不足 500 uL,可以用水或 TE补足。
2) 加入 50 uL 的 3 M 醋酸钠(pH 5.2),混匀后冰浴 5 分钟。
3) 加入 50 uL 预冷的本产品,充分混匀后冰浴 10 分钟。
4) 65℃水浴直到溶液变浊或出现分层为止(一般需要 1-5 分钟)。
5) 室温 12000-15000×g 离心 2 分钟(不能低温离心),离心后上层为无色透明,下层为红色。
6) 将上清转移到新的离心管中。
7) 如果需要,可以重复步骤 3~6。
8) 加 1 倍体积的异丙醇或两倍体积的乙醇,混匀, 12000-15000×g 离心 30分钟。
9) 弃上清后用 70%酒精洗 2 次。
10) 空气干燥沉淀后加入 100 uL 无内毒素的水或 TE 缓冲液溶解沉淀。
11) 测定 DNA 和内毒素的含量,与未纯化的样品比较。
2. 对蛋白质和其它生物样品
1) 整个操作同上
2) 略去第 2 步操作,加 3 M 醋酸钠(pH 5.2)的目的是为沉淀核酸。
3) 第 4 步改为 37℃保温以免蛋白质变性,溶液呈混浊状或分相一般需要 20-30分钟。
4) 略去第 8 步和以后操作。
Copyright © 2021 新疆宝信源柏生物技术有限公司 版权所有!
新ICP备2022000265号-1 新公网安备 65010502000866号