预期用途

无需病毒分离培养，从病例标本、环境样本或培养毒株核酸中靶向扩增新型冠状病毒基因组，结合Illumina或Nanopore高通量测序平台完成病毒基因组测序；实验结果仅供基础研究参考。

检测原理

新冠病毒基因组结构

新冠病毒测序流程

（本试剂盒为逆转录和多重PCR过程）

本试剂盒针对新冠病毒基因组序列设计多重PCR扩增引物，首先对病毒RNA进行逆转录，随后利用多重PCR引物对新冠病毒的全基因组进行靶向扩增。仅需少量RNA即可获得新冠病毒全基因序列，可完美对接二代测序和三代测序平台，结合IPH-Nuno测序分析软件轻松获得新冠病毒基因组序列及变异位点信息。

产品组份

适用仪器

本试剂扩增在ABI、伯乐等普通PCR仪器上进行，反应产物可上二代测序仪和三代测序仪进行建库测序。

样本要求

呼吸道标本；鼻咽拭子、深咳痰液、肺泡灌洗液、肺组织活检标本等，以上标本经核酸提取后用于全基因组捕获。

实验步骤

1. 逆转录

在 0.2ml PCR管配置以下反应体系，按以下条件反应：

2. PCR扩增

在 0.2ml PCR管配置以下反应体系，轻弹试管，混合，瞬时离心，按以下反应条件：

Primer Pool 1体系：

Primer Pool 2体系：

Primer Pool 3体系：

注：PCR循环数。

注意事项

1. 实验结果仅供基础研究参考；

2. 检测结果与样本的收集、保存、处理及RNA提取密切相关，请妥善进行该过程；

3. 请谨慎处理样本，防止感染；

4. 临床实验室应该严格按照《临床基因扩增实验室工作规范》中的要求配备设备及操作人员，应严格按照说明书要求进行操作。