QuantiNova SYBR Green PCR Kit

用于高灵敏度、特异性和超快的基于SYBR Green的qPCR获得无与伦比的结果
货号:208052/4/6/7
品牌:QIAGEN
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特点

    · 具有内置颜色指示器的精确反应设置

    · 精确、稳健地检测到一个拷贝的目标

    · 由于新的热启动机制,特异性无与伦比

    · 在一个试管中灵敏检测多达5个目标

    · 对于灵活的工作流程,在30°C下反应稳定性高达100小时

 

产品详情

QuantiNova SYBR Green PCR Kit (SYBR qPCR kit)具有增强的特异性、灵敏度、速度和过程安全性,为基于SYBR Green的qPCR设定了新标准。一种新的热启动机制显著提高了实时PCR的特异性,优化的化学反应在任何实时PCR循环器上从cDNA或gDNA产生精确的定量结果,甚至检测到单个目标拷贝。最后,内置的颜色指示器可确保正确的移液。

使用QuantiNova Probe PCR Kit (probe qPCR kit)避免在较低温度下误判的有害影响。基于一种新的抗体介导的热启动机制,该试剂盒增强了基于探针的实时PCR的特异性和效率,以在各种实时PCR循环器上提供准确的单链或双链、cDNA或gDNA分析。此外,它还可在室温下保持高达100小时的极端稳定性,无需任何冷却剂,因此非常适合处理高通量样品和自动化工作流程。用于视觉识别正确移液的内置跟踪系统为您提供了绝对的安心,同时对极低的目标量进行极其灵敏的检测,确保每次都能获得可靠的qPCR结果。

QuantiNova Multiplex PCR Kits (multiplex qPCR kits) 能够通过多重实时PCR或两步RT-PCR在单个试管中快速可靠地定量多达5个cDNA或gDNA靶点。Q-bond技术和优化的主混合物可在1小时内促进超快多重实时PCR。即用4x主混合物中独特的热启动和PCR缓冲系统的组合确保了任何实时循环器上的高灵敏度qPCR,无需优化,还提供了室温下的自动反应设置选项。用于目视识别正确移液的内置跟踪系统有助于防止人为错误,并且与用于cDNA合成的QuantiNova Reverse Transcription Kit 的结合允许包含QuantiNova内控RNA,以监控成功的逆转录和qPCR。

 

性能

内置颜色指示器,用于精确的反应设置

QuantiNova PCR Kits 提供的主混合物含有惰性蓝色染料,不会干扰实时PCR,但会增加试管或井中的能见度。QuantiNova黄色模板稀释缓冲液含有惰性黄色染料。当模板核酸在QuantiNova黄色模板稀释缓冲液中稀释并添加到主混合物中时,溶液的颜色从蓝色变为绿色(见下图),提供了每个反应设置正确的视觉指示。

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QuantiNova SYBR Green PCR Kit

QuantiNova SYBR Green PCR Kit 的高灵敏度导致即使是单个目标拷贝的准确和稳健检测(见图“单拷贝目标的稳健和灵敏检测”)。即使在超快循环条件下,也能实现这种极端灵敏度。

Robust and sensitive detection of single-copy targets.

QuantiNova SYBR Green PCR Kit 可用于多种模板量。该SYBR实时PCR试剂盒的性能已在8个数量级(从100ng到10fg cDNA)的动态范围内进行了测试,无论使用何种仪器,定量都是准确和稳健的(见下图)。

 

Accurate quantification over a wide dynamic range.

QuantiNova化学的严格特异性和异常灵敏度在QIAGEN转子基因Q上产生了最佳结果,但可用于任何实时PCR循环仪,无论其格式、快速循环能力和是否需要被动参考染料。如果需要,可将QuantiNova SYBR绿色PCR试剂盒提供的ROX简单地添加到主混合物中。使用转子基因Q、安捷伦技术公司Mx3005P、应用生物系统公司7900 HT Fast、ViiA 7、StepOnePlus和7500 Fast、罗氏光循环仪480和Bio-Rad CFX96的扩增和定量结果始终稳健和灵敏。

与其他SYBR Green PCR kits相比,QuantiNova SYBR Green PCR Kit提供了更好的结果。无论循环条件或仪器如何,QuantiNova化学明显产生更低的CT值、更高的再现性和更高的反应效率。

QuantiNova黄色模板稀释缓冲液在反应设置期间提供了安心,但不需要QuantiNova SYBR Green PCR Kit 获得优异的结果。QuantiNova chemistry设计灵活,因此可以将其纳入任何已建立的工作流程。因此,性能与您感兴趣的放大目标以及您选择的仪器和稀释缓冲液是最佳的。

QuantiNova Probe PCR Kit

该探针实时PCR试剂盒的实时PCR Mix 可在30°C下储存100小时,而不会影响后续反应的性能。 QuantiNova Probe PCR Kit 具有优异的稳定性,即使在不使用任何冷却剂的情况下在室温下长期储存,也非常适合高通量反应设置和板堆处理。

储存对反应稳定性的影响

在30°C下储存100小时前后的CT值比较。包括主混合物、模板cDNA、引物和TNF探针在内的实时PCR在30°C下孵育100小时,并与新制备的反应一起在实时PCR中运行。测试了3种不同模板量的三次反应。与供应商L的探针PCR试剂盒相比,在30°C下延长样品储存后,QuantiNova Probe PCR Kit 提供的CT值没有变化。

QuantiNova Probe PCR Kit 的高灵敏度导致即使是单个目标拷贝的准确和稳健检测。与这些试剂盒一起提供的特殊主混合物能够在单个试管中准确定量2个丰度相差很大的靶。这节省了时间、金钱,并减少了所需样本材料的数量。此外,获得的双链PCR数据与从单链PCR获得的数据相当。

QIAGEN专有且经充分验证的缓冲液技术与新的QuantiNova DNA聚合酶、QuantiNova抗体和QuantinovaGuard的独特组合,确保了首次尝试时的实时PCR成功,而无需进行昂贵且耗时的优化,即使在具有挑战性的实时PCR分析中也是如此。

QuantiNova Probe PCR Kit 可用于任何实时循环仪。ROX在单独的管中提供,如果使用将ROX用作被动参比染料的循环器,则可以添加。该试剂盒在灵敏度、重现性和效率方面在不同循环器之间提供高度一致的结果。尽管不同循环器的不同快速循环能力导致不同的循环协议,但结果的一致性仍得以保持。

QuantiNova Multiplex PCR Kits

QuantiNova Multiplex PCR Kits 提供的特殊主混合物允许快速建立多重反应,并在第一次尝试时提供成功的结果,提供与单一多重PCR数据相当的多重PCR数据。高度浓缩的4x主混合物可容纳高达800 ng的模板输入,确保即使在高达5倍的反应中也具有出色的灵敏度。该试剂盒可以清楚地区分模板量的微小差异,并提供丰度差异很大的目标的精确定量。

一种新型的抗体介导的热启动机制确保了卓越的特异性,并允许在室温下进行反应设置,非常适合自动化程序。特别开发的快速PCR缓冲液含有添加的Q键,可显著减少退火和延长时间,允许在不到一小时内进行多重qPCR。视觉移液控制有助于防止人为错误并提高过程安全性,尤其是与定量两步RT-PCR的QuantiNova Reverse Transcription Kit 中提供的内部控制RNA结合时。

QuantiNova Multiplex PCR Kits 通过使用超快和过程中控制的多重qPCR,从有限的样本材料中获得更多信息,从而提高了工作效率。

 

原理

QuantiNova PCR Kits 提供具有最高特异性的cDNA或gDNA分析,这是因为一种新型的抗体介导的热启动机制(见下图)。在低温下,QuantiNova DNA聚合酶通过QuantiNova抗体和稳定复合物的新型添加剂QuantinovaGuard保持在非活性状态。这提高了热启动的严格性,并防止非特异性退火引物和引物二聚体的延伸。在将温度升高至95°C的2分钟内,QuantiNova抗体和QuantinovaGuard变性,QuantiNova DNA聚合酶被激活,从而实现扩增。

Principle of the novel QuantiNova hot-start mechanism.

此外,QuantiNova chemistry还包括一些功能,可以在不损失PCR敏感性和效率的情况下简化您的工作流程。主混合物和QuantiNova黄色稀释缓冲液中的惰性染料用作每个反应已正确设置的视觉指示器。主混合物的蓝色增加了反应容器中内容物的可见性,并在添加在QuantiNova黄色稀释缓冲液中稀释的模板核酸时变为绿色。QuantiNova SYBR PCR Kits 中包含的PCR缓冲液的独特配方增强了热启动机制的严格性,并缩短了循环步骤,因此您的PCR速度更快,吞吐量也可以提高。

QuantiNova Multiplex PCR Kits 可在标准和快速循环仪上在宽动态范围内提供高度灵敏和快速的结果,无需优化。特别开发的快速PCR缓冲液含有添加剂Q键,可显著减少退火和延长时间。

在同一反应中而不是在单独的反应中扩增参考基因和目标基因通过最小化处理误差提高了基因定量的可靠性。此外,定量两步RT-PCR的 QuantiNova Reverse Transcription Kit 中提供的内部对照RNA可用于监测成功的逆转录和qPCR。

QuantiNova Multiplex PCR Buffer 包括K+和NH4+离子的平衡组合以及独特的合成因子MP,它们共同促进引物和探针对核酸模板的稳定和有效退火,从而实现高PCR效率(见下图)。

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QuantiNova Multiplex PCR Kit MasterMix 可以方便地在2–8°C下储存长达12个月,而且反应设置在室温下非常稳定,允许自动化程序提高效率和准确性。

 

操作流程

QuantiNova PCR Kits包含即用主混合物,无需优化反应和循环条件。只需将模板gDNA或cDNA和引物(基于SYBR Green的检测)或模板gDNA和cDNA、引物和探针(基于探针的检测)添加到主混合物中,并遵循手册中的协议,在任何实时循环仪上获得快速可靠的结果。ROX无源参比染料在单独的管中提供,染料浓度可根据所用循环器的类型进行调整。因此,无论格式或循环条件如何,QuantiNova PCR Kits几乎可以用于任何实时循环仪。由于优化的ROX浓度,通过自动数据分析实现了甚至低拷贝数的检测。

QuantiNova Multiplex PCR Kits 包含即用4x master mixes,无需优化反应和循环条件。只需将多达800 ng的模板DNA和引物探针集添加到主混合物中,并遵循手册中的协议,即可在任何实时循环仪上获得快速可靠的结果。试剂盒在单独的试管中提供ROX被动参比染料,以调整适当的ROX浓度(如果仪器需要)。

为了在实时两步RT-PCR中获得最佳结果,我们建议使用QuantiNova Reverse Transcription Kit合成cDNA,该试剂盒仅在20分钟内提供快速cDNA合成,并集成去除基因组DNA污染。它还提供QuantiNova内部控制RNA,为成功的逆转录和qPCR提供过程中监测。

 

应用

QuantiNova SYBR Green PCR Kit 可用于任何实时循环仪上基于SYBR Green的cDNA靶基因表达分析和定量gDNA分析。这包括应用生物系统公司、Bio-Rad、Cepheid、Eppendorf、生命技术公司、罗氏公司和安捷伦公司的仪器,以及Rotor Gene Q。

QuantiNova Probe PCR Kits 可用于基于探针的cDNA靶基因表达分析和任何实时循环仪上的定量gDNA分析。这包括应用生物系统公司、Bio-Rad、Cepheid、Eppendorf、罗氏和安捷伦的仪器。

QuantiNova Multiplex PCR Kits 可用于任何实时循环仪上的cDNA或gDNA靶的多重基因表达分析。为了充分利用多重效益的能力,我们建议使用容量高达5倍的仪器,如转子基因Q。

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