产品简介

α-KGDH（EC 1.2.4.2）广泛存在于动物、植物微生物和培养细胞的线粒体中，是三羧酸循环调控关键酶之一，催化α-酮戊二酸氧化脱羧生成琥珀酰辅酶A。

α-KGDH催化α-酮戊二酸、NAD+和辅酶A生成琥珀酰辅酶A、二氧化碳和NADH，NADH在340nm有特征吸收峰，以NADH的生成速率表示α-KGDH活性。

溶液的配制

1．试剂二：为易挥发试剂，用完后尽快密封，-20℃保存；

2．试剂五：临用前取 1 支试剂五，加入 1 mL 试剂三，充分溶解，用不完的试剂 2-8℃保存 4 周；

3．试剂六：临用前取 1 支试剂六，加入 1.5 mL 试剂三，充分溶解，用不完的试剂-20℃分装保存 4 周，避免反复冻融；

4．试剂七：临用前取 1 支试剂七，加入 1 mL 试剂三，充分溶解，用不完的试剂-20℃分装保存 4 周，避免反复冻融（1 支粉剂溶解后可做 100T，为了延长使用时间，此产品多给 1 支粉剂）；

5．试剂八：临用前取 1 支试剂八，加入 0.4mL 蒸馏水，充分溶解，用不完的试剂-20℃分装保存 4 周，避免反复冻融；

6．工作液的配制：临用前依次取 8.05 mL 试剂三、0.2 mL 试剂四、1 mL 试剂五、1.25 mL 试剂六、0.5 mL试剂七（共 11mL，约 55T），充分混合待用，现用现配。

注意：实验之前建议选择 2-3 个预期差异大的样本做预实验。如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。

需自备的仪器和用品

紫外分光光度计/酶标仪、水浴锅/恒温培养箱、台式离心机、可调式移液器、微量石英比色皿/96孔UV板、研钵/匀浆器、冰和蒸馏水。