鼠尾样品裂解液(不含蛋白酶K)

货号:SL1038
品牌:Coolaber
存储条件:RT
有效期:18个月
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SL1038-500mL 500 mL ¥198.00 请登录 请登录

储存条件

RT,有效期24个月。

 

自备试剂

蛋白酶K溶液(10mg/mL) ,异丙醇,70% 乙醇,TE或者水都可以。

 

裂解液准备

每mL 裂解液中加入40uL的蛋白酶K溶液(10mg/mL)。

 

裂解步骤

1:剪切鼠尾,尽量剪碎;

2:加入750uL的裂解液(确认已经加入蛋白酶K);

3:55℃ 至少保温 3h以上(每隔一小时震荡10s),或者直接55℃保温20h(可以过夜,或者放48小时都可以)。

4: 70℃ 保存5min,冰上放置5min

 

纯化步骤方法一(沉淀法):

1: 12000rmp/min离心10min ,取上清(上清中含DNA);

2: 将上清加入等体积(720uL)的异丙醇中;

3: 颠倒混匀,-20℃放置 15-30min;

4:  12000rmp/min 离心 10-20min。小心吸弃上清(沉淀中含DNA);

5:用 70%乙醇冲洗管壁(0.5-10mL),12000rmp/min离心10min ,小心吸弃上清;

6:自然干燥或者吹风机吹干后,加入50uL TE (TE可以65℃ 预热后加入)溶解沉淀;

7:所得DNA可直接作为PCR的模板使用。

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