产品简介
利用 80%乙醇可以把样品中可溶性糖与淀粉分开,利用双波 长比色法测定支链淀粉含量。
支链淀粉是高度分支的多糖,淀粉中直链淀粉和支链淀粉的比例和含量对淀粉产品的加工、物化特性、糊化温度等有着直接的影响,对于不同比例直、支链淀粉的研究具有重要意义。
自备仪器和用品
可见分光光度计、水浴锅、可调式移液器、1mL 比色皿、乙醚(或石油醚)和蒸馏水。
试剂组成和配制
试剂一:液体 50mL×1 瓶;4℃保存;
试剂二:乙醚(或石油醚)(分析纯);(自备)
试剂三:液体 60mL×1 瓶;4℃保存;
试剂四:液体 5mL×1 瓶; 4℃保存;
试剂五:液体 1mL×1 瓶;4℃保存。
试剂六:支链淀粉标准品 10mg×1 支;4℃保存。(配置方法见后面标准曲线制备)
注意事项
1、样本前处理中加试剂三前尽量让乙醚(或石油醚)蒸发干净,然后震荡混匀将沉淀分散开,以便于 90℃水浴后能充分溶解;
2、乙醚(或石油醚)吸取比较困难,可以选择玻璃移液器,有些微体积误差不影响实验;
3、标准品为支链淀粉纯品,加入试剂三后常温即可溶解,标准曲线只需做一次;
4、样本前处理好后,需要取 1-2 个相对差异较大的样本作预试,以确定样本最佳浓度(一般建议选择样本测定 OD 值在 0.2 左右的浓度来测定)。
5、支链淀粉显色为棕红色,样本测定时可能会有直链淀粉颜色干扰而看不到原本的颜色,但不影响吸光值测定。
6、如酶标仪有相应波长,也可以将最后的显色液吸取 200-300μL 进 96 孔板,在相应波长(550nm 和 743nm)下读取其吸光值,此时必须自己制作标准曲线用同样的方式读数。
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