产品简介
复合体Ⅰ(EC 1.6.5. 3)又称 NADH-CoQ 还原酶或 NADH 脱氢酶,广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞的线粒体中,是线粒体内膜中最大的蛋白复合物。该酶催化一对电子从 NADH 传递给 CoQ,同时可使 O2还原生成 O2-,是呼吸电子传递链上产生 O2-的主要部位。测定该酶活性,不仅可以反映呼吸电子传递链(ETC)状态,而且可以反映活性氧(ROS)生成状态。
复合体Ⅰ能够催化 NADH 脱氢生成 NAD+,在 340nm 下测定 NADH 的氧化速率计算出该酶活性的大小。
溶液的配制
25T 溶液的配制:
1、 试剂二:临用前加入 2 mL 丙酮;
2、 试剂三:溶于 1 mL 丙酮,可分装后-20℃保存。临用前再用丙酮 100 倍稀释后使用,现用现配;
3、 试剂四:临用前加入 2 mL 蒸馏水,现配现用;
4、 工作液的配制:临用前将试剂二和试剂三 1:1 混合,现配现用。
50T 溶液的配制:
1、试剂二:临用前加入 3 mL 丙酮;
2、试剂三:溶于 1 mL 丙酮,可分装后-20℃保存。临用前再用丙酮 100 倍稀释后使用,现用现配;
3、试剂四:临用前加入 2 mL 蒸馏水,现配现用;
4、工作液的配制:临用前将试剂二和试剂三 1:1 混合,现配现用。
注意:实验之前建议选择 2-3 个预期差异大的样本做预实验。如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。
需自备的仪器和用品
紫外分光光度计、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、1mL 石英比色皿、研钵/匀浆器、丙酮、冰和蒸馏水。
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