产品简介
磷脂酶 D(Phospholipases D,PLD)催化水解磷脂酰胆碱末端的磷脂酰二酯键生成磷脂酸和胆碱,胆碱在胆碱氧化酶催化作用下生成甜菜碱和过氧化氢,过氧化氢在过氧化氢酶的作用下将 4-氨基安替比林和重蒸酚氧化成粉红色物质,在 500nm 处有特征吸收峰。
溶液的配制
1.提取液二:试剂易挥发,用完后快速拧盖,封口膜缠口;
2.试剂三:试剂放于试剂瓶内玻璃管中临用前取一支加入 3 mL 乙醇充分溶解后取上清使用;2-8℃可以分装保存 2 周,避免反复冻融;
3.标准品:50umol/mL 胆碱溶液,临用前用试剂一稀释 100 倍即 500nmol/mL 标准溶液备用(可以取10μL50umol/mL 胆碱溶液加入 990μL 试剂一混匀即 500nmol/mL 标准溶液)。
注意:实验之前建议选择 2-3 个预期差异大的样本做预实验。如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者 增加样本量进行检测。
需自备的仪器和用品
可见分光光度计、水浴锅、超速冷冻离心机、可调式移液枪、天平、1mL 玻璃比色皿、研钵/匀浆器/细胞超 声破碎仪、蒸馏水、无水乙醇和冰。
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