■ 制品内容 (24 次量) | ||||||||||||||||||
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■ 制品说明 | ||||||||||||||||||
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■ 保存 | ||||||||||||||||||
-20℃。 | ||||||||||||||||||
■ Takara BKL Kit原理 | ||||||||||||||||||
■ 注意事项 | ||||||||||||||||||
1. Ligation Solution I 请于冰中融解,使用前混匀。应避免多次反复冻融。 2. 连接转化效率低时,请试用下述方法进行改进。 ① 确认感受态细胞的转化效率。 ② 延长连接反应时间至过夜反应。 ③ 连接反应后向溶液中加入NaCl使其终浓度为500 mM,再做细菌转化。 如果以上操作仍不能改善连接效率,则需对连接后的DNA进行纯化。 3. 当使用具有lacZ基因的载体克隆短链DNA片段时,有时即使插入了DNA片段也会有不出现停止密码或者读框不改变的情况发生,在颜色选择培养基上形成淡蓝色的单菌落。 4. 短链DNA克隆时,有时会有插入内含数个串联DNA片段的克隆体出现。 5. 如果PCR反应过程中需要加入矿物油,则要注意勿将其带入后面的反应液中。 6. 带有磷酸基的3’凹陷末端的DNA片段无法使用本试剂盒进行末端平滑化反应。 |
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