产品简介
PPO 主要存在于动物、植物、微生物和培养细胞中,是一种 含铜的氧化酶,能使一元酚和二元酚氧化产生醌,从而引起褐化, 与果蔬加工、茶叶品质等密切相关;同时酚类物质对病原微生物 有抑制和杀伤作用,具有一定的抗病能力。
多酚氧化酶能够催化底物酚产生醌,后者在 420nm 处有特 征性光吸收。
自备仪器或用品
可见光分光光度计、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、 1cm 光径比色皿、研钵、蒸馏水、冰。
注意事项
1、细菌或细胞样本前处理:
A:称重法:提取时可以先取离心管用万分之一天平称重,再收集细菌或细胞到离心管内,1000 转/分钟离心 5min 后弃上清,再次称重,减去空离心管重量,再按 2(mg):1000(μL)或 1(mg):1000(μL)的比例加入提取液,超声破碎(冰浴,功率 20%或 200W,超声 3s、间隔 10s,重复 30 次),8000 转/分钟 4℃离心 10min,取上清待测,结果按照组织计算方法计算;
B:细胞个数法:先收集细菌或细胞到离心管内,离心后弃上清;按照细菌或细胞数量(10的4次方个):提取液体积为 500~1000:1 的比例(建议 500 万细菌或细胞加入 1mL 提取液),超声波破碎细菌或细胞(冰浴,功率 20%或 200W,超声 3s、 间隔 10s,重复 30 次);8000 转/分钟常温离心 10min,取上清待测。
2、粗酶液提取完,吸出一部分在 90℃以上水浴中煮沸 5min,取出流水冷却,作为对照管煮沸的上清用。
3、试剂一在使用前先混匀使其分散完全后,再吸取进行提取。
4、本实验组织/细胞样本用试剂一提取很重要,提取后的粗酶液除了测定蛋白以外,不能用于测定其他指标,以防止产生干扰。
Copyright © 2021 新疆宝信源柏生物技术有限公司 版权所有!
新ICP备2022000265号-1 新公网安备 65010502000866号