产品简介
α-GAL (EC 3.2.1.22)广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞中,能专一地催化α-半乳糖苷键的水解,主要 参与棉子糖、水苏糖、蜜二糖和半乳甘露聚糖等半乳糖苷的降解。α-GAL对于植物种子的萌发至关重要,种子萌 发初期,其催化产生的D-半乳糖通过糖酵解途径迅速转化和消耗,为种子的萌发提供最初的能量来源,后期则主 要参与细胞壁储藏多糖水解。
α-GAL分解对-硝基苯-α-D-吡喃半乳糖苷生成对-硝基苯酚,后者在400nm有最大吸收峰,通过测定吸光值升高 速率来计算α-GAL活性。
溶液的配制
1、试剂一:临用前取 1 支加入 1.25 mL 蒸馏水,充分溶解备用;用不完的试剂-20℃分装保存 4 周,避免反 复冻融(1 瓶粉剂溶解后可做 100T,为了延长使用时间,此产品多给 1 瓶粉剂);
2、标准品:5 μmol/mL 的对硝基苯酚溶液。
注意:实验之前建议选择 2-3 个预期差异大的样本做预实验。如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者 增加样本量进行检测。
需自备的仪器和用品
可见分光光度计/酶标仪、低温离心机、水浴锅/恒温培养箱、可调式移液器、超声破碎仪、微量玻璃比色皿/96 孔板、研钵/匀浆器、冰和蒸馏水。
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