原理
在普通培养基中添加无色的特异性酶的显色底物,经目标菌的酶解作用释放出显色基团使细菌呈现不同颜色。
组成成分
蛋白胨,氯化钠,琼脂,显色底物
操作步骤
1. 称取瓶内47.5克干粉,加入10支选择性添加剂,用1000ml蒸馏水或纯水溶解,可按比例缩小。
2. 搅拌至琼脂溶解。
3. 加热至100℃,并按照常规配制方法不断搅拌。如果用高压灭菌器溶解,加热温度不要超过100℃。混合物可以在微波炉内加热,煮沸后立即移出微波炉,直至琼脂完全溶解(大量气泡代替泡沫产生)。
4. 水浴冷却至50℃,轻轻摇动搅匀,倾注至已灭菌带盖直径为90mm培养皿(15ml/ 皿)或者试管中,使其凝固。可室温保存数天,勿存储于冰箱中。
5. 按国家标准、SN标准、FDA标准或其它方法制备样品液与增菌液。
6. 建议使用二步增菌法:
(1)前增菌:将处理过的样品25.0g置于225.0mL缓冲蛋白胨水中,混合均匀后37℃培养6~8h;
(2)选择性增菌:取前增菌液1.0mL加入到9.0mL四硫磺酸钠煌绿增菌液(TTB)中,混合均匀后37℃培养18~24h。
7. 划线接种,35~37℃培养18~24小时。
8. 观察结果。挑取显色平板上呈品红色,扁平透明,边缘光滑,直径约2mm的可疑菌落进行进一步的试验。
9. 可使用MicrogenTMGN-ID或API20E或生化管试验,对疑似沙门氏菌菌落进行生化鉴定。
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