产品简介
本产品源于Escherichia coli K12菌株,是一种生长快速的菌株。T-Fast 感受态细胞中突变的 ΔlacZM15 基因产物与载体携带的β- 半乳糖苷酶基因表达产物实现α互补,适用于菌落蓝白斑筛选,lacIq 基因更严谨的控制Lac 启动子的开启,从而较大的降低了蓝白斑筛选中的假阳性率。此外,T-Fast感受态细胞中endA1的突变有利于克隆DNA的稳定和高纯度质粒DNA的提取,且质粒得率要高于其他常用克隆菌株。本产品经特殊工艺处理,可用于DNA的化学转化,转化效率可达108 cfu/μg DNA,本菌株具有T1噬菌体抗性(fhuA2)。
基因型:
F’proA+B+ lacIq ΔlacZM15 / fhuA2 Δ(lac-proAB) glnV galK16 galE15 R(zgb-210::Tn10)TetS endA1 thi-1 Δ(hsdS-mcrB)5
产品特点
■ 快速生长:菌株生长快速,涂布于琼脂平板后 6 h 可见菌落, 8 h 可挑取单克隆菌落;过夜培养的单克隆菌落于 3 ml 液体LB培养基中培养 4h 即可用于质粒提取。
■ 快速转化:适用于 Ampr 载体的 5 min 快速转化流程。
■ 高质粒得率:相同 OD600 条件下,T-Fast 感受态细胞质粒得率高于 DH5α 20%。
■ 高阳性率:携带lacIq 基因,可更严谨的控制Lac启动子的开启,从而提高篮白斑筛选的阳性率。
下游应用
DNA化学转化
储存条件
-90℃~-65℃冻存半年,避免反复冻融。
保质期
6个月,生产日期见管盖。
实验结果
图1 三种感受态细胞生长曲线对比
过夜培养的菌液调整OD600 至一致,以1:100 的比例接种于LB 液体培养基,每0.5-1 h 测定一次OD600,每次三个重复。
图2 过夜培养菌落的生长情况比较(12 h)
T-Fast 菌株 (左) DH5α 菌株 (右)
表1. 两种感受态细胞提取pET30a 质粒得率对比
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