产品简介

生物素又称维生素 H、辅酶 R，是水溶性维生素，也属于维生素 B 族，B7。生物素作为羧化酶 的辅酶，是参与糖异生、脂肪酸合成与氨基酸代谢不可或缺的物质，是一种维持人体自然生长、发 育和正常人体机能健康必要的营养素。 生物素在 210 nm 处存在紫外吸收，可利用紫外检测器测定其含量。

产品内容

提取液：液体 30 mL ×1 瓶，4℃保存。本提取液中含有不溶物，需摇匀后使用。

试剂一：液体 5 mL ×1 瓶，4℃保存。

试剂二：液体 1.5 mL ×1 瓶, 4℃保存。

试剂三：粉剂×2 瓶，4℃保存。

标准品：粉剂×1 瓶，4℃避光保存。临用前加入 1 mL 0.1 mol/L KOH 配制成 5 mg/mL 生物素标 准溶液，4℃密封保存，避免阳光直射。

实验前准备工作

1. 将 1 瓶试剂三溶解到 1000 mL 超纯水中，再加入 0.55 mL 的试剂二，混匀，得到流动相 A。

2. 将 1000 mL 配制好的流动相 A、甲醇（色谱纯）用滤膜抽滤。（配制好的流动相 A 采用 0.22 µm 水系滤膜抽滤，甲醇采用 0.45 µm 有机系滤膜抽滤）。

3. 将抽滤好的流动相超声 20 min，除去气泡。

4. 标准品的配制：将 5 mg/mL 的生物素标准溶液采用倍比稀释的方法分别用蒸馏水稀释成 1000μg/mL、500 μg/mL、100 μg/mL、20 μg/mL、4 μg/mL 的生物素标准溶液。（标准品浓度仅供参 考，可根据实际样品浓度进行调整）。4℃避光保存（密封），测试前采用水系针头式过滤器过滤 到棕色进样瓶内，待测。

试验中所需的仪器和试剂

高效液相色谱仪（Polaris C18-A 色谱柱（4.6×250 mm），紫外检测器（VWD））、台式离心 机、可调式移液枪、研钵/匀浆器、EP 管（1.5 mL）、针头式过滤器（水系） 、注射器、抽滤器、 滤膜（水系、有机系）、棕色进样瓶、超纯水、甲醇（色谱纯）。