产品简介
生物素又称维生素 H、辅酶 R,是水溶性维生素,也属于维生素 B 族,B7。生物素作为羧化酶 的辅酶,是参与糖异生、脂肪酸合成与氨基酸代谢不可或缺的物质,是一种维持人体自然生长、发 育和正常人体机能健康必要的营养素。 生物素在 210 nm 处存在紫外吸收,可利用紫外检测器测定其含量。
产品内容
提取液:液体 30 mL ×1 瓶,4℃保存。本提取液中含有不溶物,需摇匀后使用。
试剂一:液体 5 mL ×1 瓶,4℃保存。
试剂二:液体 1.5 mL ×1 瓶, 4℃保存。
试剂三:粉剂×2 瓶,4℃保存。
标准品:粉剂×1 瓶,4℃避光保存。临用前加入 1 mL 0.1 mol/L KOH 配制成 5 mg/mL 生物素标 准溶液,4℃密封保存,避免阳光直射。
实验前准备工作
1. 将 1 瓶试剂三溶解到 1000 mL 超纯水中,再加入 0.55 mL 的试剂二,混匀,得到流动相 A。
2. 将 1000 mL 配制好的流动相 A、甲醇(色谱纯)用滤膜抽滤。(配制好的流动相 A 采用 0.22 µm 水系滤膜抽滤,甲醇采用 0.45 µm 有机系滤膜抽滤)。
3. 将抽滤好的流动相超声 20 min,除去气泡。
4. 标准品的配制:将 5 mg/mL 的生物素标准溶液采用倍比稀释的方法分别用蒸馏水稀释成 1000μg/mL、500 μg/mL、100 μg/mL、20 μg/mL、4 μg/mL 的生物素标准溶液。(标准品浓度仅供参 考,可根据实际样品浓度进行调整)。4℃避光保存(密封),测试前采用水系针头式过滤器过滤 到棕色进样瓶内,待测。
试验中所需的仪器和试剂
高效液相色谱仪(Polaris C18-A 色谱柱(4.6×250 mm),紫外检测器(VWD))、台式离心 机、可调式移液枪、研钵/匀浆器、EP 管(1.5 mL)、针头式过滤器(水系) 、注射器、抽滤器、 滤膜(水系、有机系)、棕色进样瓶、超纯水、甲醇(色谱纯)。
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