RIPA裂解液(中)

货号:AR0105
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产品概况

产品货号AR0105
产品名称RIPA裂解液(中)
产品描述对于5×10^6 个细胞的抽提样品,本品可以抽提200次,对于0.1g的组织抽提样品,本品可以抽提100次,本产品可在60分钟的时间内完成蛋白的提取。
产品说明博士德RIPA裂解液是最可靠的缓冲液之一,其主要成分含1% NP-40, 0.5% Sodium deoxycholate, 0.1% SDS,该缓冲液能够从细胞质,膜和核蛋白质中提取蛋白质,并且与许 多应用相容,包括报道分析,蛋白质分析,免疫分析和蛋白质纯化。RIPA缓冲液不含蛋白 酶或磷酸酶抑制剂,如果需要,可将酶抑制剂添加到试剂中以防止蛋白质水解并维持蛋白质 的磷酸化状态。一些蛋白激酶和其他酶可能对RIPA缓冲液的组分敏感,导致其活性降低。 在这种情况下,准备不含脱氧胆酸钠和SDS的RIPA缓冲液。
材料需要

蛋白酶和磷酸酶抑制剂

2ml离心管

组织研磨器

能达到10000g的离心机

细胞刮

注意事项

1.抽提蛋白的所有步骤都需在冰上或4℃进行。

2.裂解得到的蛋白样品,含有较高浓度的去垢剂,不建议用Bradford 法测定蛋白浓度,可以选用BCA蛋白定量试剂盒测定蛋白浓度。 

3.裂解产物中经常会出现一小团透明胶状物,属正常现象。该透明胶状物为含有基因组DNA等的复合物。在不检测和基因组DNA结合特别紧密的蛋白的情况下,可以直接离心取上清用于后续实验;如果需要检测和基因组结合特别紧密的蛋白,则可以通过超声处理打碎打散该透明胶状物,随后离心取上清用于后续实验。如果检测一些常见的转录因子,例如NFKB、p53等时,通常不必进行超声处理,就可以检测到这些转录因子。


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