主要用途

组织 NADPH 氧化酶活性光度法定量检测试剂是一种旨在使用特异性抑制剂，通过反应系统测定样品中还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸（NADPH）氧化后峰值的降低，即采用光度法测定样品中酶活性的权威而经典的技术方法。该技术经过精心研制、成功实验证明的。其适合于各种组织样品（动物或人体）还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸氧化酶（NADPH 氧化酶）的特异活性检测。用于免疫、血液研究、蛋白组学、病理生理学等研究。产品不含污染性蛋白酶，严格无菌，即到即用，操作简捷，性能稳定，反应优化，检测敏感。

试剂组成

清理液（Reagent A） 30mL

裂解液（Reagent B） 5mL

缓冲液（Reagent C） 20mL

反应液（Reagent D） 2.5mL

阴性液（Reagent E） 2mL

底物液（Reagent F） 500μL

专性液（Reagent G） 200μL

保存方式

保存清理液（Reagent A）和阴性液（Reagent E）在 4℃冰 箱里，其余的保存在－20℃冰箱里，避免反复冻融；反应液 （Reagent D）和底物液（Reagent F），避免光照，有效保证 6个月。

用户自备

15mL 锥形离心管：用于样品操作的容器

1.5mL 离心管：用于样品操作和保存的容器

4℃（微型）台式离心机：用于样品处理

DOUNCE 匀浆器：用于裂解组织细胞

恒温培养箱或恒温水槽：用于反应物孵育

比色皿：用于光度测定的容器

分光光度仪：用于光度分析

注意事项

1． 本产品为 21 次（10 个样本）操作，包括 1 次背景对照测定；

2． 操作时，须戴手套；

3． 反应液（Reagent D）和底物液（Reagent F）注意避光；

4． 系统操作过程中，背景测定只需 1 次；

5． 样品检测前，须溶解和澄清；

6． 加样后 3 秒内进行光度测定；

7． 建议使用分光光度仪检测；

8． 光度测定后，比色皿须清洗彻底；

9． 样品 0 秒读数通常和背景空对照 0 秒读数一致；如果为总蛋白样品，样品 0 秒读数通常大于背景空对照 0 秒读数；

10. 反应测定值由高到低变化；测定持续 2 分钟；

11. 测定值由高到低变化，表明有酶活性；

12. 建议待测样本蛋白浓度为 300 至 350 微克/100μL；如果样本酶活性过低，则可以增加样本量，建议使用蛋白质浓度定量试剂盒（考马斯亮蓝法－A045-2）；

13. 如果使用纯化目标蛋白，则蛋白浓度为 1 至 5 微克/100μL；如果使用纯化膜蛋白，则蛋白浓度为 10 微克/100μL；

14. 样品实际活性是指联苯基三价碘（diphenyleneiodonium；DPI）敏感的还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸氧化酶，去除其它干扰因素；

15. NADPH 氧化酶活性单位浓度定义：在 30℃室温下，pH 7.0 的情况下，每单位酶在单位时间内（每分钟）氧化 1 微摩 尔的还原型辅酶Ⅱ（NADPH）。