2-D 去除杂质试剂盒专为制备 2-D 电泳样品而设计,使用其它方法由于会带来高电导率、高水平的干扰物质或者蛋白浓度过低,从而得到低质量的 2-D 点图。
此试剂可以定量沉淀蛋白质,而去污剂、盐、脂质、酚类化合物以及核酸等干扰物则保留于溶液中。
采用 2-D 去除杂质试剂盒处理样品,可以改善双向电泳结果的质量,减少拖尾、降低背景着色以及其他由于存在具有干扰作用的污染物而导致的假象。此试剂盒使得对污染严重的或者过于稀释的样品进行 2-D 分析成为可能。
2-D 去除杂质试剂盒的工作程序,采用了沉淀剂和共沉淀剂联合使用,来定量沉淀蛋白。被沉淀的蛋白经离心后,成为片状沉淀,沉淀物经过进一步的漂洗以去除非蛋白污染物。经第二次离心后,用变性样品溶液将片状沉淀重悬,此样品即可用于第一向等电聚焦 (IEF)。
整个过程可以在 90 分钟内完成,并且不会导致蛋白点污染或者丢失。此试剂盒含有足够处理 50 份样品的试剂,每份样品 100μl。对于更大样品体积或者较稀释的样品,可以按比例增加试剂体积。
2-D 去除杂质试剂盒可以增加荧光差异双向电泳 (2-D DIGE) 的标记效率和蛋白丰度。
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