细菌总蛋白提取试剂盒(非变性)

货号:PTE002
品牌:Coolaber
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PTE002-50T 50 T ¥398.00 请登录 请登录

产品简介

本产品用于提取细菌天然总蛋白,用于 SDS-PAGE 凝胶电泳和 Western 印迹分析以及蛋白活性测定等。采用独特的温和裂解成分,蛋白保持天然活性。得到的提取物可以直接用于 SDS-PAGE、2D 电泳、Western 印迹分析以及蛋白活性测定等下游实验。

注意:提取的蛋白如需测定蛋白浓度,可以用BCA法或Lowry法,不适用于Bradford法。

 

使用方法

使用前请将提取液添加剂全部倒入提取液中,摇晃溶解后使用。未用完的提取液可置于-20℃长期保存。

1.取 1mL 过夜培养的细菌,12,000 rpm 离心 1 分钟,弃上清,尽量吸干剩余液体。如为冰冻保存的菌体沉淀可直接进行第 2 步。

2.每 10mg 湿重菌体沉淀加入 0.6 mL提取液(确认已将加入提取液添加剂),吹打混匀。  

3.冰上放置 30 分钟至 1 小时至菌液变清。

4.4℃ 12,000 g 离心 1 分钟。

5.将上清液转移至一新的 1.5 mL 塑料离心管中即得到蛋白溶液,可置于 -80℃冰箱保存或立即使用。如果要进行 SDS-PAGE 电泳,可取部分样品到离心管中,加入 5×SDS-PAGE 上样缓冲液(终浓度为 1×),在沸水中处理 5 分钟后立即上样电泳。

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