Terminal Deoxynucleotidyl Transferase

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品名：Terminal Deoxynucleotidyl Transferase
品牌：TaKaRa
货号：2230

货号：2230

品牌：TaKaRa

存储条件：-20ºC

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SKU	包装规格	单位	目录价	您的价格	库存	数量	购物车
2230A	300 U	EA	¥269.00	请登录	请登录
2230B (A × 5)	300 U × 5	EA	¥1207.00	请登录	请登录

■ 制品内容

Cloned Terminal Deoxynucleotidyl Transferase (14 U/μl)	300 U
5X Terminal Deoxynucleotidyl Transferase Buffer	1 ml
0.1% × BSA	1 ml

■ 制品说明

本酶催化dNTP聚合于单链或双链DNA的3’-OH末端的反应，该反应不需要模板，但引物必须是至少有3个以上碱基的寡核苷酸。

■ 保存

-20℃。

■ 起源

E. coli carrying the plasmid which encodes the gene of terminal deoxynucleotidyl transferase

■ 活性定义

以DNase处理后的热变性小牛胸腺DNA为起始物，在37℃ 、pH7.2的条件下，1小时内使1 nmol的 [3H]dATP掺入酸不溶性沉淀物所需的酶量定义为1个活性单位 (unit)。

■ 特性

1. 分子量：60,000。
2. 最适pH：7.2。
3. 辅因子：二价离子Mg2+，Mn2+或Co2+。
4. 底物特异性：核酸类似物 (如5-甲基-dCTP，6-O-甲基-dGTP等) 可作为底物。三磷酸双脱氧胸腺嘧啶和三磷酸虫草菌素为终止物。

■ 用途

1. 通过Okayama-Berg法给载体或cDNA加上互补同聚尾。
2. 使用dNTP、ddNTP来标记DNA的3’末端。

■ 使用注意

1. 影响反应的因素有：添加的碱基种类 (dATP,dTTP,dCTP,dGTP)，缓冲液中的二价阳离子(Mg2+,Mn2+,Co2+)，DNA末端结构(3’-OH突出末端，平末端，3’-OH凹陷末端)。因此，每个反应都需要摸索最适条件。一般来说，添加dATP和dTTP时，含有Co2+ 的缓冲液是最佳的，而添加dCTP和dGTP时，含有Mn2+ 的缓冲液是最佳的。

2. 对于长度为15-40 bp的核酸链，如果是3’-OH突出末端，dNTPs与DNA的适合摩尔比是20 : 1，如果是3’-OH凹陷末端，dNTPs与DNA的适合摩尔比是100 : 1。

* CoCl2 缓冲液

100 mM	Sodium cacodylate（pH7.2）
1 mM	CoCl2
0.1 mM	DTT

MnCl2 缓冲液

100 mM	Sodium cacodylate（pH7.2）
2 mM	MnCl2
0.1 mM	DTT

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