产品简介
琼脂糖是由1,3连结的β-D-半乳呋喃糖和1,4连结的3,6-脱水α-L-半乳呋喃糖相间联结而成。琼脂糖具有亲水性,并几乎完全不存在带电基团,极少吸附生物大分子也极少引起其变性,是理想的惰性载体。琼脂糖在水中一般加热到90℃以上溶解,温度下降到35-40℃形成良好的半固体状的凝胶。琼脂糖凝胶是最常用的分离介质,用作电泳和层析载体,分离生物大分子(核酸、蛋白、多糖等)。
琼脂糖凝胶的优点
1、样品无需预处理,电泳操作简单,电泳速度快。
2、凝胶结构均匀,电泳图谱清晰,分辨率高,重复性好。
3、凝胶透明无紫外吸收,电泳结果可直接用紫外光灯下监测。
4、易染色,样品易洗脱,便于定量测定。制成干膜可长期保存。
琼脂糖凝胶的制备方法
1、根据电泳需要,配制电泳缓冲液。
2、准确称量的琼脂糖加入三角瓶,加入电泳液(1%琼脂糖凝胶,即为1g琼脂糖,加入100 ml 1×TAE)。总液体量不宜超过三角瓶的50%容积
3、微波炉高火加热至沸腾,保持30秒,戴上防热手套,小心摇动三角瓶,重悬未溶解颗粒,再次高火加热1-2分钟,直至琼脂糖完全溶解。
注:加热时如胶液剧烈沸腾发泡,停止加热。微波炉中加热时间不宜过长。
4、溶液冷却至60℃左右,可加入EB溶液(终浓度为0.5 ug/ml,其它核酸染料也可),并充分混匀。
5、将琼脂糖溶液倒入制胶模中,在适当位置插上梳子。凝胶厚度一般在3-5 mm之间。
6、室温下自然凝固(约30-60分钟),然后放置于电泳槽中进行电泳。
注: 凝胶不立即使用,用保鲜膜将凝胶包好后在4℃保存,可保存2-5天。
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