产品简介

1,5-二磷酸核酮糖羧化/加氧酶（Rubisco, EC 4.1.1.39）是植物光合作用中的一个关键酶，既控制着CO2的固定，同时又制约着碳素向Calvin循环和光呼吸循环分流，其活性的大小直接影响着光合速率。

在Rubisco的催化下，1分子的核酮糖-1,5-二磷酸（RuBP）与1分子的CO2结合，产生2分子的3-磷酸甘油酸（PGA）； PGA可通过外加的3-磷酸甘油酸激酶和甘油醛-3-磷酸脱氢酶的作用，产生甘油醛-3-磷酸，伴随着NADH氧化生成 NAD+；在340 nm NADH有特征吸收峰，而NAD+没有此吸收峰，因此测定340nm吸光度下降速率可以代表Rubisco 的羧化酶活性。

溶液的配制

25T 溶液的配制：

1、 试剂三：临用前取 1 支加入 0.5mL 蒸馏水充分溶解待用，振荡溶解后若出现浑浊可以离心使用；

2、 试剂四：临用前加入 1mL 蒸馏水充分溶解待用；

3、 工作液的配制：临用前在试剂二中加入全部试剂一，充分混匀，在 25℃孵育 5min。

50T 溶液的配制：

1、试剂三：临用前取 1 支加入 1 mL 蒸馏水充分溶解待用，振荡溶解后若出现浑浊可以离心使用；

2、试剂四：临用前加入 2 mL 蒸馏水充分溶解待用；

3、工作液的配制：临用前在试剂二中加入全部试剂一，充分混匀，在 25℃孵育 5min。

注意：实验之前建议选择 2-3 个预期差异大的样本做预实验。如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。

需自备的仪器和用品

紫外分光光度计、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、1mL 石英比色皿、研钵/匀浆器、冰和蒸馏水。