产品简介
1,5-二磷酸核酮糖羧化/加氧酶(Rubisco, EC 4.1.1.39)是植物光合作用中的一个关键酶,既控制着CO2的固定,同时又制约着碳素向Calvin循环和光呼吸循环分流,其活性的大小直接影响着光合速率。
在Rubisco的催化下,1分子的核酮糖-1,5-二磷酸(RuBP)与1分子的CO2结合,产生2分子的3-磷酸甘油酸(PGA); PGA可通过外加的3-磷酸甘油酸激酶和甘油醛-3-磷酸脱氢酶的作用,产生甘油醛-3-磷酸,伴随着NADH氧化生成 NAD+;在340 nm NADH有特征吸收峰,而NAD+没有此吸收峰,因此测定340nm吸光度下降速率可以代表Rubisco 的羧化酶活性。
溶液的配制
25T 溶液的配制:
1、 试剂三:临用前取 1 支加入 0.5mL 蒸馏水充分溶解待用,振荡溶解后若出现浑浊可以离心使用;
2、 试剂四:临用前加入 1mL 蒸馏水充分溶解待用;
3、 工作液的配制:临用前在试剂二中加入全部试剂一,充分混匀,在 25℃孵育 5min。
50T 溶液的配制:
1、试剂三:临用前取 1 支加入 1 mL 蒸馏水充分溶解待用,振荡溶解后若出现浑浊可以离心使用;
2、试剂四:临用前加入 2 mL 蒸馏水充分溶解待用;
3、工作液的配制:临用前在试剂二中加入全部试剂一,充分混匀,在 25℃孵育 5min。
注意:实验之前建议选择 2-3 个预期差异大的样本做预实验。如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。
需自备的仪器和用品
紫外分光光度计、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、1mL 石英比色皿、研钵/匀浆器、冰和蒸馏水。
Copyright © 2021 新疆宝信源柏生物技术有限公司 版权所有!
新ICP备2022000265号-1 新公网安备 65010502000866号