产品简介

磷酸果糖激酶（Phosphofructokinase，PFK，EC 2.7.1.11）广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞中，负责将果糖-6-磷酸和 ATP 转化为果糖二磷酸和 ADP，是糖酵解过程的关键调节酶之一。

PFK 催化果糖-6-磷酸和 ATP 生成果糖-二磷酸和 ADP，丙酮酸激酶和乳酸脱氢酶进一步依次催化 NADH 氧化生成 NAD+，在 340nm 下测定 NADH 下降速率，即可反映 PFK 活性。

溶液的配制

1、 试剂二 A：临用前加入 1mL 蒸馏水，用不完的试剂-20℃分装保存 4 周，避免反复冻融；

2、 试剂二 B：临用前加入 1mL 蒸馏水，用不完的试剂-20℃分装保存 4 周，避免反复冻融；

3、 试剂二 C：临用前取一支加入 0.25mL 蒸馏水，用不完的试剂-20℃分装保存 2 周，避免反复冻融；

4、 试剂二 D：临用前加入 1mL 蒸馏水，用不完的试剂-20℃分装保存 4 周，避免反复冻融；

5、 试剂三：临用前根据用量按照试剂三:蒸馏水为 2μL:13μL（约 3T）的体积比例充分混匀，现用现配；

6、 试剂四：临用前根据用量按照试剂四:蒸馏水为 4μL:65μL（约 13T）的体积比例充分混匀，现用现配；

7、 工作液的配制：根据样本量按试剂一：试剂二 A：试剂二 B：试剂二 C：试剂二 D =22mL：0.5mL：0.5mL：0.25mL：0.5mL（约 29T）的比例配制工作液，现用现配；。

注意：实验之前建议选择 2-3 个预期差异大的样本做预实验。如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。

需自备的仪器和用品

紫外分光光度计、水浴锅/恒温培养箱、台式离心机、可调式移液器、1mL 石英比色皿、研钵/匀浆器/细胞超声破碎仪、冰和蒸馏水。