产品简介
ICDHc(EC 1.1.1.42)广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞中,催化异柠檬酸脱氢脱羧生成 α-酮戊二酸,同时还原 NADP+生成 NADPH。ICDHc 是细胞质中除了磷酸戊糖途径外又一种 NADPH 重要来源,在逆境中该酶活性通常会发生显著变化。
利用 ICDHc 催化 NADP+还原成 NADPH 反应,在 340nm 下测定 NADPH 浓度的增加,即可反映 ICDHc 活性。
溶液的配制
1.试剂一:用时加入 50 mL 提取液溶解;
2.试剂二:用时每支加 275 μL 双蒸水充分溶解备用;
3.试剂三:用时每支加 275 μL 双蒸水充分溶解备用;
4.工作液配制:将试剂一、试剂二、试剂三按 85:1:1 的比例混合,现用现配。
注意:实验之前建议选择 2-3 个预期差异大的样本做预实验。如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。
需自备的仪器和用品
紫外分光光度计、恒温水浴锅、台式离心机、可调式移液器、1mL 石英比色皿、研钵/匀浆器、冰和蒸馏水。
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