产品简介

TIANSeq Fast RNA Library Prep Kit (Illumina) 是针对Illumina 高通量测序平台开发的非定向转录组文库构建专用试剂盒，可用于常规转录组分析及 LncRNA 等非编码RNA 的分析。本试剂盒采用快速一管式的操作流程，可对RNA 样本进行快速文库构建，在双链 cDNA 合成后，样本的末端修复和 dA 尾添加在一步完成，所得产物无需纯化即可直接用于接头的连接。此外，试剂盒采用专门设计的高效高保真聚合酶，所获得的 PCR 富集产物保真度高、无碱基偏好性。

试剂盒所适用的起始样本为将总 RNA 中的 rRNA 去除的RNA（保留了 mRNA 和其他的非编码 RNA）或者从总RNA 中直接分离获得的 mRNA。总 RNA 样本的起始模板量为 10 ng~1 μg；mRNA 样本的起始模板量低至 500 pg。

产品特点

■ 可针对 mRNA 和除 rRNA 外的非编码 RNA（如 lncRNA）进行转录组分析。

■ 操作流程简便，可实现 RNA 样本的快速文库构建。

■ 文库转化率高，适用于极低起始量样本文库的高效转化。

■ PCR 富集过程中保真度高，不存在碱基偏好性。

下游应用

适用范围：适用于 Illumina 高通量测序平台 RNA 文库的构建。适用样本量：10 ng ～ 1 μg 的总 RNA ；低至 500 pg 起始的动、植物及真菌等的 mRNA。

自备试剂

1 TIANSeq rRNA Depletion Kit (H/M/R) (NR101)
2. TIANSeq Single-Indexed Adapter (Illumina) (NG214)
3. TIANSeq Size Selection DNA Beads (NG316)
4. 无水乙醇

实验结果

宽广的起始量适用范围

不同样本起始量之间FPKM(Exon，5' UTR and 3'UTR fragments) 之间的线性关系

转录本读序分布均一，5'-3' 的偏好性小

用 GeneBody Coverage 分析，天根产品 5'-3' Coverage均一性好

对于高 GC 区域无明显偏好

高GC区域偏好性分析，大鼠 Klf2 (NM_001007684) 基因，GC 含量 66.1%。红色方框内是该基因 GC 含量高的区域。